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尘肺是我国最严重的职业病，其中又以矽肺的发病率最高。矽肺是由二氧化硅（SiO2）粉尘引起的以肺纤维化为主的不可逆性进展的疾病，其致病过程的分子机理仍不清楚。国际癌症研究机构（IARC）于1996年10月正式宣布矽尘是人类致癌物（Group I），但同时指出尚需人类DNA水平的直接证据。因此，矽尘、矽肺与肺癌间的关系问题仍是职业医学界密切关注的问题。近几年来，彗星试验（单细胞凝胶电泳）作为一种快速、简便和灵敏的检测单个细胞DNA断裂的技术，广泛应用于遗传毒理、放射生物学、生物监测等领域。为研究小剂量SiO2对DNA的损伤作用及其影响因素，我们用彗星试验检测SiO2粉尘对中国仓鼠肺成纤维细胞（Chinese Hamster Lung Fibroblast，CHL）和正常貂肺Ⅰ型上皮细胞系（A normal mink lung type I epithelialcell line，CCL-64）的DNA链断裂作用，探讨小剂量（7.5～120μg/ml）SiO2粉尘损伤的剂量-效应关系。并通过去铁胺（deferoxamine，DFX）和盐酸维拉帕米（verapamil·HCl，Ver）的作用间接观察Fenton反应产生的羟自由基（hydroxyl radical，·OH）和细胞外钙离子内流对DNA损伤的影响，0 采用 Cm成纤维细胞株和 CCL－64正常貂肺1型上皮细栅进l 行体外试验。以出，粉尘不同的作用浓度（分为 ovg／ml． 75Pg／nil、11印咖、30卜咖L60ppoe、120p…六个剂量组）和时间分组门h、DZm5IeX！4t察DNA损伤，并观察了在一定曰q粉尘浓度00卜g／Inl，2卜D 下，系列浓度的 DFXO InM、0．5 InM、l．0 InM、2．阶M血和Ver （OP…、2．SPg／llil、5刀fig／Inl、10．OP归、20．OP归）对CHLl 细胞DNA链断裂的保护作用。在 董星试验时，各组细胞经过一l 定的处理后，0．25％胰蛋白酶消化制备细胞悬液（细胞浓度为 10’－D10fylnl），并用台盼兰排斥试验计算细胞存活率，经制片、细胞裂解、卜 解旋、电泳、荧光染料染色等步骤后在荧光显微镜下观察，用目镜测l 微尺测定辇星尾长（董头末端到菩尾末端的长度）作为DNA损伤程l 度的评价指标。用SPSS 4Xlfl＝作非参数统计。 与对照组相比，SIO，明显增加了 CCL64和 CHL细胞的 DNA迁 l 移距离（P＜0．of），且两种细胞对同一系列浓度S 的反应相类似。J 在粉掷度为7．5叶20卜g／Inl的剂量范围内，董星尾长随作用剂量的 增加而增加，其作用剂量与尾长均值与三次方程拟合较好；在相同作D 用条件下，2小时组一般比1小时组引起更严重的DNA损伤。DFXI （0．SAI．OInM）和彻（二＊子卫0．0卜归）gs＃效减轻90ll咖aq所 致的 DNA损伤，其保护作用随浓度加大而增加，呈良好的剂量－效 l 应关系。2．OInM的DFX可使孽星尾长减少2／3；20．0阻分ndVer作用D 后可尾长减至未作用组的l／5。J ZID 结论－SIO，粉尘确有遗传毒性，体外试验可致CHL细胞和CCL64细J 胞 DNA链断裂。作用过程中有 ROS，特别是 Fento反应产生的·OH的参与。在a 致DNA损伤的过程中还有钙离子的参与，钙桔抗剂D 阻止细胞外钙通过质膜上钙通道内流可部分阻断这一途径。