小鼠脊髓损伤后Aβ蛋白的表达与细胞凋亡

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脊髓损伤(spinal cord injury, SCI)在骨科损伤中非常常见,属于致残率相对比较高的中枢神经系统方面的损伤。脊髓损伤之所以是一个棘手的问题主要由于其三大特点:发生率高、致残率高和手术耗费高。能够造成脊髓损伤的原因有很多种,主要原因包括交通事故、枪伤、暴力事件、高空坠物、体育事故等。根据近几年的调查数据显示,脊髓损伤发生率一直居高不下,甚至还有增高的趋势。脊髓损伤已经成为一道摆在我们面前的难题,所以加强脊髓损伤相关方面的基础研究、对临床救治、康复具有重要的意义。截止目前这方面的研究尚不是非常清楚。脊髓损伤后会发生一系列的病理损伤,大致可以分为两类:原发性损伤和继发性损伤。原发性损伤是指外力产生的撞击、压迫造成的直接性的损伤。继发性损伤主要是指在原发性损伤之后出现的一些病理改变,也是细胞病变的过程,如局部的缺血缺氧导致的炎症反应、过氧化物和自由基的产生、细胞外的Ca2+增多、能量代谢和微循环的改变、一些神经毒性作用的氨基酸的释放等,甚至引起细胞的坏死、凋亡。脊髓损伤之后首先出现局部淤血,微循环遭到破坏,形成坏死腔隙,脊髓组织发生软化,甚至出现脊髓空洞,这些都能使伤后脊髓功能的恢复受到影响。脊髓损伤在分子水平上的机制比较复杂,损伤之后细胞会产生一些有益的细胞因子和化学因子支持细胞生存,对组织存活、细胞再生、神经修复有很大帮助。还有一些有害的因子能够损害组织,阻碍细胞存活,促进细胞凋亡。研究发现Ap在脊髓损伤后促进细胞凋亡方面起到了很大的作用。目的:观察小鼠急性脊髓损伤后不同时间点Ap蛋白的变化与细胞凋亡的情况,进一步了解脊髓损伤后相关的病理生理变化。方法:130只昆明(KM)小鼠随机分为实验组(operation group)60只、假手术组(sham group)60只、空白组(negative control group)10只。实验组和假手术组均在脊髓胸8至胸12节段打开椎板,暴露脊髓。实验组采用改良Allen法打击脊髓后缝合伤口;假手术组打开椎板暴露脊髓后直接缝合。实验组和假手术组分别于2h、12h、24h、3d、7d、14d六个时间点随机选取5只进行模型制作,脊髓损伤部位取材,空白组选取5只,直接取同样节段脊髓,免疫组化学方法观察Ap蛋白与凋亡细胞的表达变化。同样方法各选取5只用Western blot方法检测脊髓Ap蛋白表达变化。结果:脊髓损伤后实验组各个时间点的Aβ蛋白含量和阳性细胞数量较假手术组各时间点和对照组明显增加,实验组各个时间点的Ap蛋白含量和阳性细胞数量随时间的增加而增加,3-7d达到最高,并呈现一定的规律性,假手术组各个时间点的结果均没有变化;TUNEL细胞凋亡百分比在脊髓损伤后随时间的改变逐渐增加,实验组较对照组增加明显。结论:脊髓损伤后Aβ蛋白随时间的变化呈规律性改变;细胞的凋亡具有相似的趋势。
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