【摘 要】
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目的:研究中药丹参提取物丹酚酸B对人鼻息肉来源成纤维细胞（Human nasal polyps fibroblasts,NPFs）增殖、凋亡的作用及探讨其分子机制。方法:使用不同浓度梯度的丹酚酸B作用于体外培养的NPFs,利用CCK-8法检测丹酚酸B最佳药物浓度及作用条件,进行实验分组为:对照组、TGF-β1刺激组、丹酚酸B组、TGF-β1和丹酚酸B共同作用组。利用MTT法检测各实验分组细胞增殖差
【基金项目】
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上海市自然科学基金（122R1424700）
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目的:研究中药丹参提取物丹酚酸B对人鼻息肉来源成纤维细胞（Human nasal polyps fibroblasts,NPFs）增殖、凋亡的作用及探讨其分子机制。方法:使用不同浓度梯度的丹酚酸B作用于体外培养的NPFs,利用CCK-8法检测丹酚酸B最佳药物浓度及作用条件,进行实验分组为:对照组、TGF-β1刺激组、丹酚酸B组、TGF-β1和丹酚酸B共同作用组。利用MTT法检测各实验分组细胞增殖差异,利用Annexin V-FITC/PI双标法检测各实验分组细胞凋亡差异,利用Western Blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax表达水平的改变,以及利用Caspase-3试剂盒检测Caspase-3蛋白活性。结果:CCK-8结果显示丹酚酸B能够抑制NPFs细胞增殖,抑制率与丹酚酸B作用浓度呈正相关,选取丹酚酸B浓度为10μmol/L为最佳作用浓度,72 h时抑制率低于50%为最佳作用条件,进行后续实验。MTT结果显示丹酚酸B不仅能够抑制NPFs细胞增殖,而且明显抑制TGF-β1对NPFs的增殖促进作用。Annexin V-FITC/PI双标法结果显示丹酚酸B促进NPFs细胞凋亡（P＆lt;0.05）,且抑制TGF-β1对NPFs抗凋亡作用。经丹酚酸B作用后,Caspase-3蛋白的活性升高;Western Blot结果显示丹酚酸B能降低Bcl-2蛋白表达,升高Bax蛋白表达,增大Bax/Bcl-2比值,差异有统计学意义。结论:丹酚酸B对NPFs具有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用,其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白、上调Bax蛋白表达,增大Bax/Bcl-2比值,提高Caspase-3蛋白活性有关。
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