预构人工皮瓣修复战创伤复杂性创面的实验研究

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【研究背景】在战争与自然灾害条件下对各种战创伤所遗留的大面积皮肤软组织缺损创面的修复,特别是对血管、神经及骨骼等深部组织暴露或有胸腹壁大面积洞穿性缺损的特殊创面修复一直是战创伤救治中较难解决的问题。【研究目的】利用组织工程皮肤联合自体组织移植技术将人工真皮与预构皮瓣技术相结合修复肌腱、骨骼外露的深部创面,为治疗战创伤复杂性创面提供一种新的方法。【研究方法】选取健康S-D大鼠105只,雄性,鼠龄为6~8周,体重为150-200g,首先取25只标记编号后,随机分成A、B、C、D、E五组(A组为人工真皮预构皮瓣组,B组为传统预构皮瓣组,C组为人工真皮皮下直接修复组,D组为人工真皮筋膜下直接修复组,E组为植皮组)。A组在右腹壁按照右腿部设计的创面大小进行取皮,制备同样大小的人工真皮覆盖于腹壁筋膜组织创面上方,将皮片修薄后回植于人工真皮表面。28天后,沿预构好的筋膜皮瓣切开,筋膜皮瓣完整掀起后断离周围,仅保留腹壁浅动、静脉作为蒂部的筋膜瓣。在大鼠右足踝关节处制作肌腱、骨骼外露的创面,在右腿创面和右腹部皮下进行钝性分离形成皮下隧道。将制备好的筋膜瓣从隧道通过,完整包裹于腿部创面缝合固定。B组不放置人工真皮,其余和A组完全相同。C组制作右腿创面,右腹壁按照右腿部创面大小进行取皮。切开腹壁筋膜皮瓣形成带蒂筋膜瓣后通过皮下隧道缝合固定,在其上方置入同样大小的人工真皮,最后在人工真皮上方植皮。D组制作右腿创面,右腹壁按照右腿部创面大小进行取皮。将制备好的人工真皮放置于腿部创面上方,切开腹壁筋膜皮瓣形成带蒂筋膜瓣后通过皮下隧道缝合固定,上方植皮修复创面。E组制作右腿创面,腹壁取皮后修薄植于创面上方。各组术毕均用无菌纱布、自粘绷带于功能位包扎腿部伤口,无菌纱布、绷带包扎腹壁伤口,佩戴大鼠保护套。每组最后一次手术术后第28天分别通过大体观察、人工皮瓣观察,愈合良好的组再每组以同样方法做40只,通过活动度观察、肿胀度观察、组织学观察、影像学观察等方法进行测定。【研究结果】1、人工皮瓣大体观察结果:术后第28天,A组、B组大鼠右腿创面均已愈合,C组、D组、E组创面均未愈合,对A组、B组进行测量对比。2、双腿活动度观察:测量A组、B组术后第28天足踝关节活动度,采用t检验,结果示A组左侧和右侧、B组左侧和右侧、A组和B组的左侧、A组和B组的右侧四种比较的差异均无统计学意义(P>0.05)。3、双腿肿胀度观察:测量A组、B组术后各时间点大鼠双侧足踝关节处周长,统计结果采用t检验,结果示A组术前和术后第7天,术后第7天和术后第14天,术后第14天和术后第21天,术后第21天和术后第28天统计结果的差异均有统计学意义(P<0.05),术前和术后第28天的统计结果差异无统计学意义(P>0.05)。B组术前和术后第7天,术后第7天和术后第14天,术后第14天和术后第21天,术后第21天和术后第28天统计结果的差异均有统计学意义(P<0.05),术前和术后第28天的统计结果差异无统计学意义(P>0.05)。A组和B组之间术前、术后第7天、术后第14天、术后第21天、术后第28天的统计结果差异无统计学意义(P>0.05)。4、组织学检查:测量A组、B组术后各时间点CD31+免疫组化阳性累计光密度值(IOD),各组间IOD值比较采用t检验,结果示术后第7天和术后第14天,术后第14天和术后第21天统计结果的差异均有统计学意义(P<0.05),术后第21天和术后第28天统计结果差异无统计学意义(P>0.05)。测量A组、B组术后第28天Masson染色切片组织厚度,组间比较采用t检验,结果示术后第28天A组和B组皮瓣切片厚度统计结果的差异有统计学意义(P<0.05)。5、影像学检查:A组、B组大鼠于术后第28天行预构皮瓣微血管造影X光机摄片,可见造影剂灌入股血管、腹壁浅血管及其分支,A组和B组的两侧腿部均无明显差异,说明术后第28天手术干预的腿部已经和正常腿部的血供非常相似。而A组的手术干预侧相比B组组织更厚,整个皮瓣造影亮度也更亮,说明皮瓣内有许多微小的血管形成,优于B组的血管灌注。【研究结论】1、运用人工真皮皮下直接修复的方法、人工真皮筋膜下直接修复的方法和植皮直接修复的方法修复大鼠足踝关节骨骼、肌腱外露的创面,在术后第28天创面不能完全愈合;运用人工真皮预构皮瓣的方法和传统预构皮瓣的方法修复大鼠足踝关节骨骼、肌腱外露的创面,在术后第28天创面可以完全愈合。2、预构人工皮瓣在皮瓣大体观察、双腿活动度、双腿肿胀度中都与传统预构皮瓣无明显差异,在影像学观察比较中皮瓣血液灌注优于传统预构皮瓣,在皮瓣厚度的观察比较中显著厚于传统预构皮瓣。
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