光皮桦与河桦种间杂种鉴定及其组织培养研究

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光皮桦(Betula luminifera)和河桦(Betula nigra)均为桦木科(Betulacea)桦木属(Betula)落叶乔木。光皮桦不仅速生且材质优良,河桦具有较强的耐水湿、耐热旱、耐瘠薄等特性。通过光皮桦与河桦杂交,将河桦优良抗性基因引入光皮桦,创制优质、速生、高抗新品种具有重要现实意义。本文以前期获得的光皮桦与河桦种间杂交子代为材料,利用SSR对杂种的真实性进行鉴定,分析杂种苗期的形态特征和光合特性,研发配套的组织培养技术。其主要结果如下:1、分子标记鉴定中,利用亲本光皮桦、河桦对引物进行筛选,发现BL(515)、BL(555)和BL(563)等12对引物在父本河桦中皆能扩增出12条特异性条带,可用于杂种后代的真伪性鉴定。杂交子代的鉴定结果表明,29株子代中皆出现了父本特异性条带,确认为光皮桦与河桦种间杂交的真杂种。2、在形态特征和光合特性方面,种间杂种与光皮桦、河桦均存在着明显差异。种间杂种春季萌芽早于河桦,但比光皮桦迟。杂种的主干单位面积、叶长、叶宽、叶柄长、叶面积、叶色值与光皮桦、河桦间皆存在显著差异,且在数值上多介于光皮桦与河桦之间。杂种的光饱和点(LSP)为1292.0μmol/(m2·s),低于光皮桦、河桦;杂种的光补偿点(LCP)为46.3μmol/(m2·s)高于光皮桦、河桦。光合-CO2响应测定显示河桦、杂种、光皮桦在CO2饱和点下的净光合速率(Pn)分别为21.46、14.78、11.4μmol CO2/(m2·s)。3、选取种间杂种生长旺盛期的嫩茎作外植体,依次用75%的酒精冲洗3-4次、0.1%的HgCl2浸泡10min,接种后无菌率达85.5%,存活率为80.3%。通过实验得到适宜杂种培养的生根培养基为MS+0.5mg/L IBA。在叶片分化研究中,获得适合杂种叶片分化的培养基为MS+0.05mg/LNAA+0.4mg/LTDZ。以上结果不仅证实光皮桦与河桦间无明显生殖障碍,而且为后续优良杂种的创制及其快繁奠定了基础。
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