荧光定量RT-PCR检测鼻咽癌患者外周血微转移的研究

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目的探讨荧光定量RT-PCR检测外周血CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达在鼻咽癌患者外周血微转移诊断中的价值。方法筛选符合入组标准的鼻咽癌患者87例,经详细询问病史、认真查体、完善相关的影像学检查,治疗前1周内,由两名耳鼻咽喉头颈外科主治医师以上确定肿瘤TNM分期和临床分期,参照中医辨证分型标准确定中医证型,组织分化程度以病理科病理报告结果为准。采用荧光定量RT-PCR方法检测87例入组患者外周血CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达情况,并分析其与肿瘤TNM分期、临床分期、组织分化程度及中医证型之间的关系。结果1、87例鼻咽癌患者外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA阳性表达率分别为64.4%(56/87)、58.6%(51/87),两者联合检测的阳性表达率为71.3%(62/87),5例远处转移鼻咽癌患者的外周血和5例肿瘤组织中均有表达(CK14 mRNA、EGFR mRNA阳性表达率为100%),而10例正常人外周血中未见表达;2、鼻咽癌患者外周血CK14 mRNA、EGFR mRNA的阳性表达率与年龄、性别经统计学分析无关(P>0.05),而与肿瘤的组织分化程度、临床分期有关(P<0.05);3、鼻咽癌患者外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平与T分期、N分期、临床分期有关(P<0.05),分期越晚,外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平越高;4、鼻咽癌患者外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平与组织分化程度有关(P<0.05),低分化鳞癌外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平高于高中分化鳞癌;5、鼻咽癌患者的中医证型在不同临床分期上的分布具有统计学意义(P<0.05),中医证型中气血凝结型主要集中在Ⅰ期,占54.5%(6/11),痰浊结聚型主要集中在Ⅱ期,占64%(16/25),火毒困结型主要集中在Ⅲ期,占61.5%(24/39),正虚毒滞型主要集中在Ⅳ期,占66.7%(8/12),且外周血CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平与中医证型有关(P<0.05),正虚毒滞型>火毒困结型>痰浊结聚型>气血凝结型。结论1、荧光定量RT-PCR方法检测鼻咽癌患者外周血CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达,能够较准确反映外周血微转移的情况,在诊断鼻咽癌患者外周血微转移方面有一定的可行性;2、鼻咽癌患者外周血微转移与肿瘤的恶性程度和病情进展有关;3、鼻咽癌患者中医辨证分型与临床分期关系密切,随着临床分期的进展,其中医证型呈现出“气血凝结型→痰浊结聚型→火毒困结型→正虚毒滞型”总的演变趋势,且随着中医证型的演变,外周血中CK14 mRNA、EGFR mRNA的表达水平逐渐升高。
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