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马尾松(Pinus massoniana Lamb.)是我国南方地区低山丘陵荒山造林的先锋树种,在我国林业生产中占有十分重要的地位。开展马尾松快速繁殖和体细胞胚胎发生等技术的研究,对其遗传转化体系建立、开展基因研究等都有重要意义。本实验以湖南省林科院天际岭林场优良母树枝梢顶端分生组织为外植体,通过实验设计,探讨了外植体愈伤组织诱导的条件；对诱导产生的愈伤组织进行了形态学和细胞学鉴定和胚性愈伤组织转化实验设计,并对愈伤组织诱导器官发生进行了研究。实验结果表明：1、湖南省马尾松枝梢顶端分生组织最佳的采集时期是3月中旬到4月底,愈伤组织诱导率最高达89.8%,平均诱导率在80%以上；愈伤组组织增殖能力强,在形态上表现为白色或淡绿色,结构疏松半透明状,表面湿润有粘性,显微镜下观察发现有类胚性愈伤组织产生。2、冰箱保存时间对马尾松外植体愈伤组织诱导没有明显影响,2012年4月16日采集的外植体在冰箱冷藏保存了114天后,仍然有84.0%的愈伤组织诱导率。这说明采样一定要在最佳时期采,若不能及时进行诱导,可在冰箱里冷藏。此外,冰箱保存一定时间可以明显降低外植体愈伤组织褐化率。3、马尾松枝梢顶端分生组织最佳的愈伤组织诱导培养基为10“培养基：改良GD+NAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+2,4-D1.0mg/L+CH1000mg/L+Gln500mg/L+蔗糖30.0g/L和12#培养基：改良GD+NAA1.0mg/L+6-BA1.0mg/L+2,4-D3.0mg/L+CH1000mg/L+Gln500mg/L+蔗糖30g/L。4、外植体最佳接种长度为0.1-0.2cm,愈伤组织细胞在切口处大量增殖和生长,外植体全部分化成愈伤组织,诱导率最高80%以上,几乎没有褐化和污染现象发生。外植体最佳接种方式是竖直接种,竖直接种的外植体愈伤组织形成较早,在切口处形成大量细胞群,愈伤组织细胞分布较均匀,褐化和污染程度较低。5、TDZ在愈伤组织细胞生长和维持细胞活力方面起着重要作用,但是单独使用TDZ并不能满足愈伤组织正常的生长需求；低浓度的KT不利于愈伤组织细胞的生长和发育,随着KT浓度的升高,褐化现象逐渐得到缓解,愈伤组织生长发育状态和形态表现较好；当肌醇浓度为2.0g/L时愈伤组织生长状况最好。