食管鳞癌中RKIP和MMP-10的表达及其预后分析

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目的分析Raf激酶抑制蛋白(phosphatidylethanolamine-binding proteins,RKIP)和基质金属蛋白酶-10(Matrix metalloproteinase-10,MMP-10)mRNA和蛋白质在食管鳞癌组织中的表达情况以及两者之间的相互关系,并分析其表达的高低与临床病理和预后之间的关系。方法收取42例食管鳞癌患者的手术标本(2015年2月-2016年2月),提取癌和癌旁组织中的RNA,逆转录成cDNA后使用荧光定量PCR(qRT-PCR)检测RKIP和MMP-10在RNA水平的表达情况,探索二者表达与临床病理的关系以及二者相关性,并使用免疫组织化学SP法检测部分标本的癌与癌旁组织的蛋白表达,探究其表达差异。同时取2011-07—2014-11广西医科大学胸外科手术切除的食管鳞癌组织、癌旁组织的病理蜡块,采用免疫组织化学SP法检测检其中RKIP和MMP-10蛋白的表达,同样分析其表达与临床病理的关系和二者相关性,并作出预后分析;结果在新鲜组织标本中RKIP和MMP-10表达的研究中发现,癌旁正常组织中RKIP mRNA的表达量为鳞癌中的2.01倍,差异有统计学意义(t=5.126,P=0.000);食管鳞癌组织中的MMP-10 mRNA的表达水平高于癌旁正常组织,为癌旁组织的2.08倍,差异有统计学意义(t=5.983,P=0.000);RKIP和MMP-10的mRNA的表达量与患者的性别、年龄、分化程度均无关(P>0.05),与淋巴结转移和TNM分期有关;RKIP mRNA的低表达和MMP-10 mRNA的高表达往往导致更晚的分期和淋巴结转移的倾向;RKIP mRNA和MMP-10 mRNA在RNA水平的表达同样呈现负相关(r=-0.527,P=0.000)。为了研究同一组织中RNA和蛋白表达的关系,同时对同批样本中的35例组织进行免疫组织化学SP法进行两指标蛋白水平的检测,发现RKIP蛋白在癌组织中的表达明显低于癌旁组织(x2=11.209,P=0.001),MMP-10蛋白在癌组织中的表达明显高于癌旁组织(x2=23.333,P=0.000),RKIP和MMP-10的转录水平与翻译水平的表达趋势一致。而在生存分析资料的免疫组织化学的研究中发现RKIP在食管鳞癌组织、癌旁组织的阳性表达率分别为28.26%、67.39%,食管鳞癌组织中的RKIP阳性表达率明显低于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(x2=28.227,P=0.001);MMP-10在食管鳞癌组织、癌旁组织的阳性表达率分别为71.74%、9.78%,食管鳞癌中MMP-10的阳性表达率明显高于癌旁组织,且差异有统计学意义(x2=73.127,P=0.000);RKIP和MMP-10的表达呈负相关(r=-0.372,P=0.000);在与临床病理学关系的研究中发现RKIP的表达仅与淋巴结转移有关(P<0.05);而MMP-10的表达与淋巴结转移与否以及TNM分期密切相关(P<0.05),Kaplan-Meier生存分析得出RKIP阴性的生存率低于阳性组(P<0.01);MMP-10阳性组的生存率低于阴性组(P<0.01),Cox回归分析得出淋巴结转移、RKIP阴性表达以及MMP-10阳性表达均可作为食管鳞癌患者的独立预后因子。结论RKIP和MMP-10在RNA和蛋白质水平表达趋势一致,且RKIP的低表达和MMP-10的高表达可能与食管鳞癌的发生、发展、侵袭以及转移密切相关,在食管鳞癌的诊断和评估有着很大的价值,并有可能作为食管鳞癌患者诊疗过程中的一个潜在的生物靶点。同时两指标的表达有很强的预后相关性,并且通过研究发现可视为独立的预后因子。二者在食管鳞癌组织中的表达呈负相关,RKIP可能通下调MMP-10的途径参与到食管鳞癌的侵袭、转移等过程。
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