转基因技术发展至今,人们不断地开发新方法来制备转基因鸡,病毒载体法是目前制备转基因鸡最常用的方法,但该方法存在效率相对较低的缺陷。为了提高病毒载体对鸡胚的转染效率,开发一种病毒载体法制备转基因鸡的增强试剂,本研究进行了以下试验:1.通过比较携带增强型绿色荧光报告基因（Enhance Green Fluorescent Protein,EGFP）的慢病毒载体和腺病毒载体与脂质体介导的EGFP质粒载体对体外培养的鸡胚成纤维细胞（Chick Embryo Fibroblasts,CEF）的转染效率,发现病毒载体比脂质体介导的质粒载体对CEF细胞转染效率更高;在发育至X期的鸡胚胚盘下腔中显微注射包含0.036%、0.1%和0.36%羧甲基纤维素（Carboxymethylcellulose,CMC,一种食品工业中的增稠剂）的病毒载体缓冲液,发现所有浓度的CMC均显著增加了缓冲液在胚盘下腔的停留时间,该结果表明CMC或可通过延长病毒载体对鸡胚的作用时间提高其转染效果。2.为探索CMC是否影响病毒载体本身的转染效力,在包含浓度为0.36%、0.1%和0.036%CMC的HEK293T细胞培养基分别中加入0.3μL、1.0μL、3.0μL EGFP慢病毒或EGFP腺病毒,发现0.036%CMC不会影响EGFP慢病毒对HEK293T细胞的转染效率,其余上述所有浓度CMC均显著降低了EGFP慢病毒和EGFP腺病毒对HEK293T细胞的转染效率,降低幅度随CMC浓度增加;在包含浓度为0.36%、0.1%和0.036%CMC的CEF细胞培养基分别中加入0.3μL、1.0μL、3.0μL EGFP慢病毒或EGFP腺病毒,发现除个别实验组外,上述所有浓度CMC均不同程度地显著降低EGFP慢病毒和EGFP腺病毒对CEF细胞的转染效率。3.将包含0.1%CMC的EGFP慢病毒液和EGFP腺病毒液显微注射到X期鸡胚中,发现添加0.1%CMC后不会显著影响鸡胚的生存率。将包含0.036%、0.1%和0.36%CMC的EGFP慢病毒液和EGFP腺病毒液显微注射到X期鸡胚中,发现上述所有浓度CMC均提高了含有荧光蛋白鸡胚数的比例,但差异不显著;然而,统计各组中荧光表达量最高的鸡胚数后发现,EGFP腺病毒注射组中添加0.1%CMC可以显著提高荧光表达量最高的鸡胚数。上述结果显示,虽然CMC会在一定程度上降低病毒载体对细胞的转染效率,但CMC可以延长其在鸡胚中的作用时间,最终提升其对鸡胚的转染效果。本研究进一步完善了病毒载体法,为更好地制备转基因鸡奠定了基础。