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1.研究背景及目的：胰腺癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,起病隐匿、早期诊断非常困难、发展十分迅速、预后较差,死亡率较高。胰腺癌是在遗传因素和环境因素的共同作用下,经过多阶段复杂的生物学演变而形成的恶性疾病。大部分患者在其就诊时已经属于晚期,手术切除率只有10%-20%,5年生存率不足5%。胰腺癌病人的预后与是否能够早期诊断及治疗方案选择是否合理密切相关。因此,寻找能够早期诊断胰腺癌的特异性分子指标,对胰腺癌的早期诊断和指导治疗具有重要意义。MACC1是一种在结肠癌中新发现的致癌基因,且与肿瘤转移和病人预后高度相关。而MACC1在胰腺癌中的研究尚未见报道,故本课题对MACC1在胰腺癌中的表达情况及其在胰腺癌肿瘤增殖、迁移和耐药中的作用进行了研究。2.研究方法：2.1经我院伦理委员会及病人同意,我们收集了自2010年1月到2011年12月60例胰腺癌病人血清及49例正常人血清。采用ELISA法测定这109例血清标本中MACC1的蛋白表达量,并结合临床资料进行统计分析。2.2在基因水平和蛋白水平上检测5株胰腺癌细胞系中MACC1的表达量,并验证3种MACC1siRNA的干扰效果,确定效果最好的一对siRNA用于后续实验。2.3采用MTT试验检测干扰胰腺癌CFPAC-1细胞系中MACC1的表达对胰腺癌细胞增殖的影响。2.4进行transwell迁移实验,观察MACC1对胰腺癌细胞系CFPAC-1迁移的影响,并检测EMT相关蛋白的表达变化。2.5采用MTT试验和流式细胞学技术,检测干扰MACC1后胰腺癌细胞系CFPAC-1对吉西他滨化疗耐药的影响,并检测凋亡相关蛋白的变化,并探讨MACC1在胰腺癌迁移及化疗耐药过程中发挥生物学作用的机制。3.结果：3.1通过ELISA法检测,我们首次发现MACC1在肿瘤病人血清中也存在高表达情况。60例胰腺癌病人血清中,有38例呈阳性表达；而在49例正常人血清中,只有2例存在阳性表达情况。在胰腺癌病人中,我们发现,MACC1高表达与胰腺癌病人淋巴结转移、远处转移及TNM分期相关。3.2MACC1在胰腺癌细胞系CFPAC-1中表达最高,BXPC-3细胞系表达较弱,AsPC-1、PANC-1和MIA PaCa-2等细胞系中,MACC1几乎检测不到表达。在3对siRNA引物中,第2对引物干扰效果最好。3.3MTT试验结果显示,干扰掉MACC1后,对胰腺癌细胞系CFPAC-1的增殖具有显著的抑制作用。3.4迁移试验表明,干扰掉MACC1后,明显降低了CFPAC-1细胞的迁移能力,且Westemblot方法发现这也引起了EMT相关蛋白E-cadherin的上调。3.5流式检测和MTT试验同时显示,干扰掉MACC1后,导致CFPAC-1细胞对吉西他滨更为敏感,相关抗凋亡蛋白Bcl-2、Caspase-3. Caspase-9减少,且通路蛋白Ras和p-ERK1/2也随之减少。4.结论：4.1MACC1在胰腺癌血清中高表达,且与胰腺癌的转移及TNM分期相关。4.2干扰掉MACC1后可显著抑制胰腺癌细胞系的增殖、迁移,并增加其对吉西他滨的敏感性。4.3MACC1可能通过Ras/ERK通路发挥其生物学作用。