羟考酮预先给药对大鼠肾缺血再灌注时细胞凋亡的影响

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目的:通过羟考酮预先给药大鼠肾缺血再灌注模型,观察肾脏病理变化、肾功能指标、Bcl-2、Bax及Caspase-3的表达,探讨羟考酮预先给药对大鼠肾缺血再灌注时细胞凋亡的保护机制。方法:36只雄性Wistar大鼠随机分为羟考酮预先给药组(Oxy组)、肾缺血再灌注组(I/R组)和假手术组(S组)三组,每组大鼠12只。Oxy组和I/R组大鼠用动脉夹夹闭左侧肾蒂,45min后恢复灌注,并于再灌注即刻切除右肾,制备肾缺血再灌注损伤模型。缺血前10min,Oxy组大鼠经尾静脉注射羟考酮0.5mg/kg,I/R组和S组大鼠经尾静脉注射等量的生理盐水。再灌注24h,采用心脏穿刺法采集血液标本,分离血清,检测血清肌酐和尿素氮浓度;采血完成后,立即切除左侧肾脏留取肾组织标本固定,制作石蜡切片,HE染色后在光学显微镜下观察大鼠肾组织病理学变化;通过免疫组织化学法检测肾组织凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达,计算Bcl-2/Bax比值。结果:与S组相比,I/R组和Oxy组大鼠肾脏具有明显病理学损伤。与I/R组相比,Oxy组病理学损伤较轻。与S组比较,I/R组和Oxy组在再灌注24 h时血清肌酐和尿素氮的浓度明显升高(P<0.05);与S组比较,I/R组和Oxy组的肾组织Bcl-2与Bax表达上调,Bcl-2/Bax降低,Caspase-3表达上调(P<0.05)。与I/R组比较,Oxy组再灌注24 h时血清肌酐和血尿素氮的浓度降低,肾脏组织Bcl-2表达上调,Bax表达下调,Bcl-2/Bax升高,Caspase-3表达下调(P<0.05)。结论:羟考酮预先给药减轻肾缺血再灌注病理和肾功能损伤,与其调节Bcl-2和Bax的平衡,抑制Caspase-3的表达,从而缓解细胞凋亡有关。
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