目的基于靶向修饰及长循环纳米载体经血液循环和肿瘤EPR效应可以提高肿瘤部位的靶向效率,但仍不能避免被血液循环中吞噬细胞吞噬导致的快速清除。本课题旨在利用机体自身中性粒细胞具有吞噬能力及在趋化因子诱导下定向迁移的特性,制备连接免疫佐剂(CpG-ODN)的紫杉醇PLGA纳米粒。其在体内被中性粒细胞吞噬,以内吞纳米粒的中性粒细胞作为“特洛伊木马”。利用定位于肿瘤部位的趋化因子CXCL1募集载药“特洛伊木马”定向迁移到肿瘤瘤部位,构筑循环的中性粒细胞吞噬—趋化因子诱导肿瘤部位释放的链式模式。以期提高肿瘤递药系统中的靶向性问题,实现肿瘤化学治疗和免疫治疗的双重治疗目的,为肿瘤治疗提供新的思路。方法1复乳法制备紫杉醇PLGA纳米粒,EDC和NHS活化纳米粒之后连接硫酸鱼精蛋白,静电吸附连接CpG-ODN,制备CpG-PTX-PLGA-NPs。2动物Airpouch模型探讨纳米颗粒和中性粒细胞的相互作用以及趋化因子对中性粒细胞的趋化作用。3C57BL/6小鼠背部皮下注射B16黑色素瘤细胞,制备黑色素肿瘤模型。肿瘤部位注射CXCL1趋化因子,尾静脉注射CpG-PTX-PLGA-NPs,给药4次之后脊椎脱臼处死小鼠,观察称量肿瘤体积、重量。评估该纳米粒对肿瘤的抑制效果。制备淋巴结细胞,免疫荧光抗体标记,流式细胞仪、共聚焦显微镜等技术检测淋巴结各种免疫细胞的表达情况。探讨CpG-PTX-PLGA-NPs抑制肿瘤的机制。4黑色素肿瘤模型小鼠血清组分检查、脏器组织冷冻切片HE染色等研究CpG-PTX-PLGA-NPs的对脏器的损伤情况。结果成功制备了连接CpG-ODN的紫杉醇纳米粒,粒径在300 nm左右,尾静脉输入黑色素肿瘤小鼠体内,肿瘤部位注射CXCL1趋化因子。纳米粒被小鼠体内的中性粒细胞吞噬,形成“特洛伊木马”;利用定位于肿瘤部位的趋化因子CXCL1募集载药“特洛伊木马”定向迁移到肿瘤部位,将药物靶向传递到肿瘤部位。黑色素肿瘤模型小鼠的抗肿瘤结果显示,与对照组相比,CpG-PTX-PLGA-NPs组抑制肿瘤生长的能力显著增强,肿瘤抑制率达70%以上。石蜡切片结果显示CpG-PTX-PLGA-NPs组肿瘤组织细胞出现大面积坏死,肿瘤细胞凋亡严重。腹股沟淋巴结图片表明CpG-PTX-PLGA-NPs组黑素色肿瘤浸润率比较低,黑色素肿瘤扩散转移情况明显改善。淋巴细胞內CD4~+T cell和CD8~+T cell细胞数均有增加,机体的免疫反应更为激烈。脏器冷冻切片HE染色结果表明看出,CpG-PTX-PLGA-NPs组有轻微的肾毒性。结论C57小鼠黑色素肿瘤模型中,CpG-PTX-PLGA-NPs治疗组在防止黑色素细胞转移,抑制原位实体肿瘤的增长方面效果显著。同时,该纳米粒一定程度上能激活免疫系统,增强机体免疫系统抵抗肿瘤的能力。