马尾神经细胞外基质修复大鼠坐骨神经缺损的实验研究

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目的:在全球范围内周围神经损伤的发病率很高,其中神经纤维完全断裂导致的大段周围神经缺损严重影响患者的生活质量,使周围神经损伤成为当今社会关注的焦点。尽管显微外科手术技术取得了长足的进步,但自体神经移植作为周围神经缺损临床治疗的金标准仍然存在很多局限性,如供体神经来源有限、供区损伤等。因此,寻找新型周围神经缺损修复材料成为研究热点。本研究以马尾神经细胞外基质(ECM)为基础修复大鼠大段坐骨神经缺损,并对其有效性进行评价。  方法:取大鼠马尾神经和坐骨神经,采用化学法去除细胞成分,保留其细胞外基质。将制备好的马尾神经ECM和坐骨神经ECM嵌入壳聚糖导管,构建马尾神经ECM移植物(CEG)和坐骨神经ECM移植物(SNG)。在体外,制备CEG薄膜与SNG薄膜,分别接种雪旺细胞(SCs)与背根神经节(DRG),对比观察两种薄膜的生物相容性及促神经再生效果。在体内,建立大鼠坐骨神经15mm长大段缺损模型(n=60),随机分为四组(n=15),分别植入CEG(CEG组)、SNG(SNG组)、单纯壳聚糖导管(CCO组)以及自体神经(ANG组)桥接缺损。术后观察12周后取材,通过神经电生理、步态分析、坐骨神经功能指数、腓肠肌肌肉湿重恢复率以及组织学分析(甲苯胺蓝染色、免疫荧光染色、透射电镜扫描)等方法对比评价上述桥接材料修复大鼠坐骨神经缺损的效果。  结果:CEG薄膜能够显著促进SCs分泌髓鞘蛋白及神经营养因子,并能够加快DRG轴突的生长,其作用与SNG薄膜相当。术后12周,CEG组、SNG组及ANG组的神经电生理、步态分析、坐骨神经指数、腓肠肌肌肉湿重恢复率及病理学观察等检测的结果都要明显优于CCO组,但CEG组、SNG组及ANG组之间统计学差异不显著。  结论:本实验制备的马尾神经ECM移植物具有良好的生物相容性,能够有效修复大鼠大段周围神经缺损,其治疗效果接近自体神经移植。
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