库拉索芦荟杀螨化合物提取分离与活性评价

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芦荟(Aloe L.)是百合科多年生草本植物,其含有多种活性物质,在医学方面具有重要的作用。芦荟也具有较强的杀虫及抑菌活性,同时发现其对螨类也具有较强的生物活性,因此从芦荟中追踪分离到杀螨化合物,并利用其开发成新型的杀螨剂具有重要的实际意义及推广价值。螨类,特别是植食性螨类被广泛认为是一种为害蔬菜、果树、花卉等作物的重要有害生物,它具有分布广,个体小,发生周期短等特点,成为一类公认的危害多种农作物的重要害螨:长期以来频繁用药的不合理,导致了螨类对较多的化学杀螨剂均产生了一定的抗药性:正源于此,开发一种绿色、安全、环境友好型农药而变得刻不容缓。本研究以库拉索芦荟(Aloe barbadensis Miller)为实验材料,用丙酮进行提取,以朱砂叶螨为主要研究对象,对库拉索芦荟粗提取物进行活性成分追踪分离及纯化,获得了一种具有显著杀螨活性的物质,并用其配制了一种植物源杀螨悬浮剂。主要研究结果如下:1.库拉索芦荟丙酮粗提物对朱砂叶螨的作用方式库拉索芦荟丙酮粗提物对朱砂叶螨具有较好的触杀活性,对雌成螨处理后48h的LC50为0.832mg/mL。因此,本论文对库拉索芦荟丙酮粗提物进行了作用方式的探索,发现库拉索芦荟丙酮粗提物对雌成螨具有较好的驱避活性、产卵抑制活性和杀卵活性,且随着浓度的增大活性增强,在5mg/mL库拉索芦荟丙酮粗提物作用下,可以抑制卵的孵化率,使其孵化率降到57%左右。库拉索芦荟丙酮粗提物还具有一定的熏蒸活性,其熏蒸死亡率最高可以达到40%左右。2.库拉索芦荟杀螨活性成分的追踪分离本文运用了硅胶柱层析法追踪分离库拉索芦荟丙酮粗提物的杀螨活性物质,库拉索芦荟丙酮粗提物经过柱层析洗脱分离后共得到82个流份,室内测定触杀活性试验表明,组分13的触杀活性最佳,其对朱砂叶螨雌成螨处理后48h的LC50为0.484mg/mL。通过重结晶纯化第13组分后,得到了橘红色的针状结晶,并测定其熔点为223~C-224-C。通过将得到的质谱、红外光谱、核磁共振、元素分析等结构鉴定有关数据进行特征数据和图谱分析,初步确定了库拉索芦荟中杀螨活性较好的化合物为芦荟大黄素。3.芦荟大黄素的杀螨活性评价对有关芦荟大黄素的杀螨活性进行评价,结果显示,该化合物对朱砂叶螨的雌成螨、若螨及幼螨具有较好的触杀活性,在处理后48h的LCso分别为0.484、0.252和0.213mg/mL;同时,对柑橘全爪螨雌成螨处理后48h的LC50为0.328mg/mL;除此之外,结果表明,芦荟大黄素对朱砂叶螨的各螨态都具有很好的驱避活性,还表现山较好的抑制产卵能力,在处理96h后,5mg/mL处理浓度下的产卵抑制活性可达到70%左右,但其杀卵活性表现不明显,在第七天各处理的朱砂叶螨卵孵化率都接近于100%。4.芦荟大黄素悬浮剂的配制及质量检测利用芦荟大黄素的性质,筛选出CH805增效剂的效果最好,并将其配制成5%芦荟大黄素的悬浮剂。使得其致死中浓度(48h)由0.484mg/mL下降为0.025mg/mL,杀螨活性得到了提高。后经热冷贮质量检测,本研究制备的5%芦荟大黄素悬浮剂的质量合格,符合农药悬浮剂的要求。5.芦荟大黄素悬浮剂对柑橘全爪螨的盆栽药效使用24%螺螨酯悬浮剂60g/L、5%芦荟大黄素悬浮剂悬浮剂125g/L、83.3g/L分别对柑橘全爪螨雌成螨进行防治的盆栽药效试验,结果表明,到施药后30d,24%螺螨酯悬浮剂60g/L、5%芦荟大黄素悬浮剂125g/L、5%芦荟大黄素悬浮剂83.3g/L药液处理区的相对防效分别为77.12%、80.08%、56.54%,且125g/L的5%芦荟大黄素悬浮剂与60g/L的24%螺螨酯悬浮剂之间没有显著性差异,综上所述,5%芦荟大黄素悬浮剂125g/L相对丁83.3g/L柑橘全爪螨具有较好控制作用,这为后期田间药效试验的浓度设置提供了一定依据。
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