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背景及目的:研究发现3周岁之前是肠道菌群定植及发育的关键时期,这一阶段被定义为生命早期。生命早期肠道菌群的正常定植对机体的健康具有重要意义,破坏生命早期肠道菌群可使多种疾病的发病率增高。生命早期肠道菌群定植的影响因素主要包括分娩方式、喂养方式、环境因素等,部分研究提出母体菌群可能通过分娩及喂养等方式向子代传递。动物实验发现干预母体孕期及哺乳期的肠道菌群对后代肠道菌群所造成的影响可以持续到第三代后代。聚山梨酯80(polysorbate80,P80)是一种人工合成的非离子型表面活性剂,其作为一种乳化剂广泛用于食品、药品的生产加工,因此育龄期女性不可避免会摄入P80。体内体外实验均证实P80能够破坏肠道屏障功能,诱导肠道低度炎症并引起肠道菌群和机体代谢的紊乱,但母体妊娠期及哺乳期摄入P80对后代是否存在负面影响以及存在何种影响目前尚无报道。本研究旨在探究母鼠孕期及哺乳期摄入P80是否可影响第二代及第三代小鼠的肠道菌群及生长发育。实验方法:将6周龄C57bl/6小鼠随机分为2组,一组给予正常饮水,另一组全程给予含1%P80的饮水,分别将各组的雌雄鼠合笼1周,妊娠成功的母鼠单独分笼饲养直至分娩出二代小鼠。小鼠生后与母鼠同笼饲养,由母鼠哺乳直到断奶,称取二代小鼠体重,留取粪便标本。各组分别处死部分二代鼠并称量肝重,留取肠道标本。各组剩余的二代鼠单独饲养5周,期间均给予正常饮水。随即各组的雌雄鼠分别合笼1周,妊娠成功的母鼠单独分笼饲养直到分娩出三代小鼠。三代小鼠与母鼠同笼饲养满3周后称重,留取粪便标本,处死,称量肝重,留取肠道标本。比较小鼠的体重、肝重,HE染色测量小肠绒毛长度。过碘酸雪夫氏染色(Periodic Acid-Schiff,PAS)计数结肠杯状细胞的数量,免疫荧光染色评价小肠分泌型IgA(secretory IgA,sIgA)的表达水平。Realtime-PCR(RT-PCR)技术分析紧密连接蛋白(ZO-1、occludin、claudin-3)及黏蛋白2(mucin 2,MUC2)的表达水平。RT-PCR检测肠道炎症细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-6)的表达水平。利用16srDNA测序技术对小鼠粪便菌群进行测序和分析。结果:(1)P80组后代小鼠体重和肝重较对照组均无显著差异(P>0.05)。P80组二代小鼠小肠绒毛长度比对照组减小,P80组三代小鼠空肠绒毛长度也较对照组减小,但回肠绒毛长度与对照组差异不显著(P>0.05)。P80组后代小鼠结肠腺窝长度均较对照组显著缩短。(2)P80组二代小鼠肠道粘菌属、梭菌属、消化链球菌科和副杆菌属较对照组减少而脱硫弧菌科、普沃氏菌属和志贺杆菌属增加;P80组三代小鼠肠道拟普沃氏菌属、粘菌属、乳杆菌属、狭窄梭菌属、艾森波伯吉氏菌属、脱硫弧菌属较对照组减少而斯莱克氏菌属、螺杆菌属、巴斯德菌属、厌氧支原体属和阿克曼菌属增加。(3)P80组二代小鼠结肠IL-6、IL-1β和TNF-α的表达升高。P80组三代小鼠结肠IL-6、IL-1β的表达也显著升高,但TNF-α的表达量与对照组无统计学差异。(4)二代小鼠结肠杯状细胞阳性计数为P80组对比对照组(4.38±0.45个vs 7.41±0.35个,P<0.05),三代小鼠为P80组对比对照组(5.90±0.74个vs 9.18±0.56个,P<0.05)。P80组结肠组织MUC2表达水平较对照组下降(0.73±0.09 vs 1.02±0.08,P<0.05)。P80组二代和三代小鼠结肠组织ZO-1和claudin3的表达较对照组均显著下降。P80组二代小鼠小肠sIgA阳性率对比对照组分别为空肠(0.69±0.22个vs 2.14±0.29个,P<0.05)和回肠(0.86±0.17个vs 2.19±0.29个,P<0.01),P80组三代小鼠小肠sIgA阳性率对比对照组分别为空肠(0.68±0.17个vs 2.21±0.46个,P<0.05)和回肠(0.62±0.18个vs 1.76±0.14个,P<0.01)。结论:母体妊娠期和哺乳期P80的摄入能破坏后代小鼠肠道屏障功能,诱导肠道菌群紊乱和肠道低度炎症,影响后代小鼠的肠道发育。