microRNA (miRNA)是一类内源性、非编码、长度为22nt左右的单链小分子RNA. miRNA通过与靶基因间的碱基互补配对使其降解或者抑制其翻译,在植物生长发育、激素调节、信号转导、植物病害、应答非生物胁迫等方面起着重要的作用。水稻(Oryza sativa)是我国重要的粮食作物。本文选取水稻miR394及其靶基因F-box(Os01g69940)为研究对象。F-box是泛素降解途径中SCF复合体的一部分,在降解蛋白质过程中是不可或缺的组分,在植物激素信号传导、形态建成以及生物钟节律等方面起到重要的作用。为了研究miR394的功能,本文构建了35S::miR394.35S::F-box、35S::m5F-box过表达载体,并通过根癌农杆菌介导法将35S::miR394载体成功转入水稻愈伤组织中,经过诱导、侵染、筛选、分化、生根、水培等过程获得12株T0代苗。通过对所获得的转基因苗的根和叶进行GUS染色等检测,确定有9株苗为阳性植株。同时,对所得的转基因阳性苗进行了DNA和RNA水平上的检测,结果表明所获得的9株转基因苗均为阳性。RNA水平上的检测结果显示,在9株转基因苗中,miR394前体基因的表达量高于野生型,而F-box的表达量低于野生型,证明了miR394对F-box的切割作用。在形态学上,我们观察到miR394过表达转基因苗与野生型相比叶片发生了较为明显的上卷现象,这种现象一致持续到水稻抽穗时期,这可能是F-box表达量降低的结果,从而影响叶片的生长。另外,本实验构建了pmiR394::GUS及pF-box::GUS的表达载体,目的是为了通过对转基因植株进行GUS定位分析,以确定miR394与F-box的表达模式。