神经胶质细胞是中枢神经系统内除神经元外的另一类细胞，其中星形胶质细胞以其数量、分布、形态学和功能等方面的优势占有特别重要的地位。研究表明：星形胶质细胞不仅具有营养和保护神经元的作用，而且参与神经系统的其他功能及脑的高级功能活动。 根据星形胶质细胞发生分化的“双谱系学说(T1A谱系和O-2A谱系)”，可将星形胶质细胞分为1型星形胶质细胞(type-1 astrocyte，T1A)和2型星形胶质细胞(type-2 astrocyte，T2A)两型。两型星形胶质细胞分别由两种不同抗原表达的祖细胞发育分化而来：T1A起源于抗原表型为Ran-2~+，A2B5~-的T1A前体细胞；T2A和少突胶质细胞(oligodendrocyte，OL)起源于抗原表型为Ran-2~-，A2B5~+的双潜能细胞—O-2A祖细胞(oligodendrocyte-type 2 astrocyte progenitor cells)。 目的 建立适合本实验室条件的分离纯化O-2A谱系细胞的方法，探讨O-2A祖细胞的体外分化规律，并从蛋白质水平揭示细胞骨架蛋白vimentin(波形蛋白)和钙结合蛋白S-100β在T1A和T2A分化过程中的表达差异，为双谱系细胞的后续研究奠定基础。 方法 根据T1A、O-2A祖细胞的生长时间差异及细胞的粘附特性不同，采用振荡法和差速贴壁法，并结合使用生长因子(PDGF，bFGF)，分离纯化O-2A祖细胞，用MTT法检测其细胞活性；观察O-2A祖细胞在有血清和无血清培养条件下的分化情况；用免疫细胞化学方法，观察vimentin和S-100β在T1A、T2A的表达情况。 结果 (1)纯化的O-2A祖细胞胞体呈椭圆形，具有典型的双极突起；经免疫细胞化学染色鉴定，A2B5抗体标记阳性，细胞纯度达95％；(2)应用20％胎牛血清(FCS)诱导O-2A祖细胞定向分化为T2A，应用无血清的化学条件培养基诱导其定O.ZA祖细胞分化和两型星形胶质细胞抗原表达差异的研究中文摘要向分化为OL;(3)TIA、O一ZA祖细胞均表达vimeniin和S一IOOD，未成熟TZA不表达vimeniin，但表达S一1 00日，成熟TZA均不表达vimentin和S一1 00p。 结论(l)采用振荡法和差速贴壁法，并结合使用生长因子，建立了分离纯化o一ZA谱系细胞的方法;(2)分离纯化的。一ZA祖细胞具有双潜能性，在体外不同培养条件下，可以定向分化为成熟TZA和OL:(3) T IA和TZA形态不同，具有分化抗原表达差异;(4)在星形胶质细胞的发育过程中，vimentin和S一1 00p的表达可能存在时间和谱系间的差异。