类固醇激素（甾体激素）是胆固醇经过一系列酶解反应产生具有亲脂性、低分子量性质的一类物质,过量摄入可扰乱人体正常生理活动,导致人体内激素紊乱、生殖发育异常甚至引发癌症。因此,加强对食品中类固醇类激素残留的检测对于保障人民身心健康具有重要意义。目前检测类固醇激素残留检测主要以仪器方法如HPLC、LC-MS/MS、GC-MS/MS等为主,虽灵敏准确,但大多需要昂贵的仪器与专业的实验操作人员、操作步骤也相对复杂,不能满足量大面广的检测需求。电化学传感器法与化学发光免疫分析方法皆属于快速检测方法,不仅具有检测范围广、灵敏度高、特异性强、稳定性好的特点,还具有成本低、操作简单,检测时间短,可实现现场检测的要求等优势,可以弥补了传统色谱检测方法的不足。本文主要以类固醇类激素中的雌三醇和氢化可的松为检测对象,分别建立电化学传感器法与化学发光免疫分析方法并用于实际样品牛奶的检测。主要研究内容及结果如下:（1）基于钴镍氧化物直接催化电化学传感器检测牛奶中的雌三醇应用低温水热法合成具有规则正六边形中孔的钴镍氧化物纳米材料,并将其修饰玻碳电极。基于雌三醇的酚羟基在通电条件下发生氧化反应形成醌的原理,建立检测雌三醇的电化学传感器方法。实验结果表明:在浓度为1¹4 nmol/L的范围内,雌三醇的浓度与电化学响应信号形成良好的线性关系,线性相关系数R²为0.999,检测限达到0.42nmol/L,且该传感器表现出良好的稳定性与重复性。在实际样品牛奶的检测实验中,回收率在92.7%¹03.7%之间。该传感器构建形式更简单,检测灵敏度优于已有报道。（2）基于磁微粒的管式化学发光免疫分析方法检测牛奶中的氢化可的松将氢化可的松进行结构改造,并与载体蛋白偶联制备抗原,通过免疫新西兰大白兔获得兔抗多克隆抗体。将氢化可的松抗原标记吖啶盐,羊抗兔二抗偶联羧基磁珠,采用竞争模式建立管式化学发光免疫分析方法,检测对象与标记吖啶盐的抗原同时竞争氢化可的松的多克隆抗体,结合物与包被羊抗兔的磁珠结合从而固定在磁微粒上,经磁场分离、洗涤加入预激发与激发液,检测发光强度从而测定氢化可的松的含量。实验的线性范围为0.42⁷2.27 ng/mL,检测限为0.12 ng/mL,IC₅₀为5.57 ng/mL。在实际样品牛奶中添加回收实验中,回收率可达到84.3%¹02.3%。实验实验结果与LC-MS/MS结果进行比对,比对结果显示出良好相关性。本研究所开展针对牛奶中类固醇类激素的电化学传感器方法与化学发光免疫分析方法具有各自的优点,为建立其他食品有害物提供了参考,同时对于加强食品中类固醇类激素的监测提供了依据。