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背景与目的:肺动脉高压(pulmonary artery hypertension,PAH)是一种极具破坏性的心肺疾病,发病率和死亡率均高,其病理特点是肺血管重构造成肺动脉压力(pulmonary arterial pressure,PAP)增高,继而造成右心室肥厚(right ventricular hypertrophy,RVH),最终导致右心室衰竭,甚至死亡。所以,逆转血管重构就是治疗PAH的关键。在肺血管重构过程中,肺动脉不同细胞的增殖/凋亡失衡和炎症反应起着至关重要的作用。黄芩素是一种黄酮类化合物,药理学作用广泛,具有抗增殖,抗炎和心脏保护作用,其作用与MAPK信号通路和NF-κB信号通路紧密相关。但是,黄芩素对PAH是否有治疗作用,其作用机制如何,目前尚不明确。因此本研究旨在探讨黄芩素对MCT诱导的PAH大鼠血管重构的影响及初步机制。方法:1.雄性SD大鼠随机分为4个组,每组10只:对照组、MCT组、MCT+黄芩素(50 mg/kg/d)组、MCT+黄芩素(100 mg/kg/d)组。SD大鼠皮下注射MCT造PAH模型后,于第14天开始灌胃给予不同剂量黄芩素,直至第28天,测定大鼠血流动力学变化后处死大鼠,测定右心室肥厚指数,观察肺形态变化。2.用苏木精-伊红染色法(hematoxylin and eosin high performance liquid,H&E)和Masson染色法观察并计算肺小动脉的中膜和肺动脉壁厚度。同时,通过H&E染色法测量右心室自由壁厚度和心肌细胞的大小,以观察肺动脉和右心室的重构。3.用H&E染色观察肺组织中的炎症反应;用定量反转录聚合酶链式反应(Quantitative reverse transcription-polymerase chain reaction,qRT-PCR)法检测肺组织中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1 beta,il-1β)、白细胞介素-6(interleukin-6,il-6)等炎症因子的mrna表达。4.用tdt介导的缺口末端标记法(tdtmediatednickdutpend-labeling,tunel)观察肺组织细胞凋亡,用westernblot测定肺bcl-2、bax、活化型半胱氨酸蛋白酶-3(cleavedcaspase-3)等凋亡相关蛋白表达。5.用蛋白免疫印迹法测定促丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase,mapk)和核因子-κb(nuclearfactor-κb,nf-κb)信号通路的蛋白表达。结果:1.黄芩素可改善mct导致的pah和右心室肥厚。与对照组比较,mct组右心室收缩压显著升高,右心室肥厚指数、右心室/体重的比值均显著增高,右心室自由壁显著增厚,右心室心肌细胞肥大且分布杂乱无序,而黄芩素可有效改善上述病理改变。2.黄芩素可抑制mct诱导的肺动脉重构。h&e和masson染色法结果显示,mct可导致肺动脉重构和纤维化,肺动脉管壁厚度指数:(肺动脉管壁厚度占管径的百分比)wt%和(管壁面积占血管总面积的百分比)wa%值明显增高,黄芩素可以有效改善上述指标变化。3.黄芩素可抑制mct诱导的炎症反应。h&e染色结果显示,mct组大鼠肺组织中血管和支气管周围有明显的炎性细胞浸润,而黄芩素减弱此炎症反应。qrt-pcr结果表明,黄芩素可降低mct所致的肺组织炎症细胞因子il-6、tnf-α和il-1βmrna表达的增高。4.黄芩素可抑制mct诱导的细胞凋亡。tunel染色法结果表明,与对照组相比,mct组凋亡细胞平均百分比显著增多,而黄芩素显著减少tunel阳性细胞平均百分比。westernblot结果表明,黄芩素可降低mct所致肺组织bax/bcl-2比率和cleavedcaspase-3表达的上调。5.黄芩素可抑制mct诱导的mapk和nf-κb信号通路的激活。westernblot结果表明,与对照组相比,mct组大鼠的肺组织中p38,erk和jnk磷酸化显著增强,而黄芩素给药组中p38,erk和jnk磷酸化显著被抑制。与对照组相比,mct组大鼠肺组织nf-κbp65表达显著增高,而黄芩素可显著抑制mct诱导的nf-κb上调。结论:1.黄芩素可改善MCT诱导的PAH和右心室肥厚,其保护作用可能与其抑制肺血管重构有关。2.黄芩素抑制MCT诱导的PAH分子机制可能与其抑制MAPK和NF-κB信号通路有关。