天麻为兰科植物天麻Gaetrodia elata Bl.的干燥块茎,是著名的川产道地药材,具有息风止痉,平抑肝阳,通络止痛的功效,常用于治疗头目眩晕、肢体麻木、癫痫、失眠、高血压等症。除此之外,天麻还应用于保健、美容等方面,国内外有较大的市场需求。四川平武作为天麻的道地产区,人工培育天麻开始于上个世纪80年代,目前,种植户已达1200户以上,平武天麻规范化种植基地已通过了国家CFDA的GAP认证。本文针对平武天麻栽培中杂交品种的品质问题及产业化发展中的产品研发滞后问题,配合四川省科技富民强县专项行动计划项目“平武天麻GAP种植技术集成及产业化开发与示范”研究,进行了平武天麻杂交品种的系统品质评价研究及天麻超微细粉的研制。主要研究内容及结果如下:1本文在课题组前期研究的基础上,从形态组织学、理化鉴别、检查、含量测定等方面,对天麻杂交品种进行了系统的品质评价研究,为保证天麻药材质量的稳定可控,临床用药的安全有效提供了科学依据。1.1对平武天麻杂交品种与其母本、父本进行了形态组织学对比研究,为天麻杂交品种的鉴别提供了一定的参考依据。原植物的形态上,主要以植株的高度、茎与花的颜色及其花序的长度等方面进行鉴别;药材性状上,主要从形状、大小及表面特征等方面进行鉴别;显微特征上,首次对天麻杂交品种与其母本、父本的针晶束、导管及多糖颗粒进行了显微数量分析,结果表明,天麻杂交品种与其母本、父本在针晶束的直径、导管直径以及多糖颗粒的大小上存在着显著性的差异。1.2在课题组前期研究的基础上,对平武天麻杂交品种与其母本、父本进行了薄层色谱对比鉴别和HPLC指纹图谱的对比分析。薄层色谱鉴别结果显示,供试品色谱中,在与对照品和对照药材色谱相对应的位置上显相同颜色的色谱斑点,但其色谱斑点的大小和颜色的深浅稍有差异,表明了各品种间化学成分量上稍有差异:天麻杂交品种与其母本、父本的HPLC指纹图谱比较,其色谱峰的数目基本一致,而峰面积上存在差异,说明其化学成分的组分基本一致,但量上有一定的差异。1.3按照2010年版《中国药典》一部附录项下方法,对不同样品进行了水分、总灰分、二氧化硫的检查及浸出物测定。结果表明,水分含量最高14.1%,最低9.0%,总灰分最高4.0%,最低2.1%,二氧化硫残留量最高2.72 mg/kg,最低1.14 mg/kg,均符合药典中相关规定;浸出物含量最高16.0%,最低7.2%,有三批不符合药典规定,其中有2批为红X乌天麻、1批为乌天麻。1.4在课题组前期研究的基础上,进行了天麻杂交品种与其母本、父本的天麻素、天麻多糖含量测定,并采用了综合加权评分法对浸出物、多糖及天麻素三者影响要素的数据进行了分析评价,结果表明乌X红天麻得分较高,其后依次是乌天麻、红天麻、红X乌天麻。2进行了天麻超微细粉的研制,并首次对不同细度的天麻超微细粉的质量、药效及安全性、天麻素溶出度等进行了系统研究,为其质量控制及应用提供了科学依据。2.1制备了 40 μm、20 μm、10 μm和5 μm四种不同规格的天麻超微细粉,并与天麻普通粉末进行了性状、显微特征的观察及薄层色谱对比鉴别。外观性状上,均呈黄白色,气微,味甘,但超微细粉比普通粉末细腻.易聚集:天麻超微细粉在普通生物显微镜下观察,已无完整的细胞,均为细胞碎片:薄层色谱鉴别均能检出天麻素,且在对照药材色谱相应的位置上有相同的色谱斑点。2.2进行了不同规格天麻超微细粉的常规检查、重金属及有害元素、SO2残留量检测和微生物限度检查,结果表明,天麻超微细粉水分最高7.1%,最低6.8%,总灰分最高2.45%,最低2.28%,两者较普通粉末低;酸不溶性灰分最高0.05%,最低0.02%,SO2残留量最高2.08mg/kg,最低1.79mg/kg,两者与普通粉末相比较没有差异:重金属及有害元素含量与微生物限度检查符合2010年版《中国药典》中的规定限度值与口服给药制剂中含药材原粉的制剂要求规定。2.3以堆密度和休止角两个指标评价了不同规格天麻超微细粉和普通粉末的流动性,结果表明,不同规格天麻超微细粉的流动性差异不大,但均比普通粉末低:不同规格天麻超微细粉的堆密度较普通粉末有所增加.表明单位容积的超微细粉质量更大。2.4进行了不同规格天麻超微细粉和普通粉末的醇溶性浸出物及天麻素含量测定,结果表明,不同规格天麻超微细粉的浸出物和天麻素含量均较普通粉末的含量高;不同粒径的超微细粉中,以10μm的浸出物含量较高,20 μm的天麻素含量较高。2.5首次模拟人工体内环境,对不同规格的天麻超微细粉和普通粉末进行了天麻素溶出度测定。结果表明,天麻经过超微粉碎处理后,其天麻素的溶出度增加,且在不同粒径的超微细粉中,以20μm的溶出度最高。2.6首次进行了天麻超微细粉的安全性评价和抗惊厥、镇静的药效研究,为临床上天麻超微粉的使用提供依据。急性毒性试验结果表明,不同规格天麻超微细粉和普通粉末的小鼠灌胃给药最大耐受量大于15 g/kg,约为成人日用剂量的150倍,属于无毒级。表明其使用安全性好。以戊四唑致小鼠惊厥模型,比较了不同规格天麻超微细粉的抗惊厥作用,结果显示:不同规格天麻超微细粉和普通粉末与对照组比较存在显著性差异(p<0.05),超微细粉与普通粉末比较,抗惊厥作用显著增强(p<0.05),以20μm的抗惊厥作用最强。以水合氯醛致小鼠睡眠模型,比较了不同规格天麻超微细粉的镇静作用,结果显示:不同规格天麻超微细粉和普通粉末与对照组比较存在显著性差异(p<0.05),超微细粉与普通粉末比较,可以延长小鼠的睡眠时间,即镇静作用显著增强(p<0.05),以20μm的镇静作用最强。综上,从药用的角度,天麻杂交品种以乌X红天麻质量较优,与其母本、父本相比较,质量有所提高;红X乌天麻质量较差,与其母本、父本相比较,质量有所降低。从质量、吸收、药效和安全性角度,并结合实际生产,选择20 μm粒径的天麻超微细粉为佳。