目的:考察明代以前中医药治疗腰痛用药规律，探讨明代以前腰痛用药规律与石氏伤科从气血立论治疗腰痛的异同；建立1月龄去双前肢直立大鼠腰椎间盘退变模型，解决椎间盘退变研究缺乏理想动物模型的瓶颈，并研究直立大鼠腰椎间盘退变的病理机制，进一步研究复方芪麝片、川芎嗪和麝香酮防治腰椎间盘退变的作用机理。　　 方法:　　 1.明代以前腰痛用药规律的文献研究　　 分别以腰痛各种症状和病名为检索词，借助“《普济方》数据库管理系统”，对明代以前治疗腰痛用药情况进行检索，并用SPSS16.0统计软件，采用分层聚类分析方法分析两种检索词检索结果中用药频次排前20位的药物。　　 2.建立直立大鼠腰椎间盘退变模型　　 将60只1月龄SD大鼠随机分为5、7、9月模型组和空白对照组，共6组(每组10只，雌雄各半)，截断各模型组大鼠双前肢，置于特制饲养笼内饲养，诱导其直立，空白对照组不处理并置于普通饲养笼内饲养。分别在术后5、7、9月依次处死相对应的模型组和空白对照组大鼠，取下腰部椎间盘，并进行形态学、免疫组化、TUNEL和细胞衰老β-半乳糖苷酶染色分析以及real-time RT-PCR分析。　　 3.观察复方芪麝片和川芎嗪对直立诱导腰椎间盘退变模型的影响　　 1月龄SD大鼠双前肢40只，随机分为空白对照组、模型组、复方芪麝片组和川芎嗪组，共四组(每组10只，雌雄各半)，分别在术后6月对复方芪麝片组大鼠进行灌胃给药，川芎嗪组大鼠进行腹腔注射川芎嗪注射液给药一个月，并分别于术后7月处死相对应的四组大鼠，取下腰部椎间盘，进行藏红和天狼猩红形态学染色、免疫组化染色以及实时定量RT-PCR检测。　　 4.观察川芎嗪和麝香酮对IL-1β诱导腰椎间盘终板软骨细胞的影响　　 分离培养大鼠腰椎间盘终板软骨细胞，用IL-1β诱导软骨细胞，分别用川芎嗪和麝香酮处理。活性细胞数目用MTT法检测，II型胶原蛋白表达用细胞免疫化学染色检测，mRNA表达由real-time RT-PCR检测，信号分子蛋白的磷酸化用Western blot技术分析。　　 结果:　　 1.根据分层聚类分析结果，结合药物的功效，大致将按腰痛症状检索结果分类如下:当归与川芎，附子与桂心，杜仲与牛膝，芍药、炙甘草与干姜(芍药甘草汤，甘草干姜汤)，防风与酒，人参、茯苓、白术与甘草(四君子汤)，萆薜与独活、细辛、生姜、石斛。按腰痛病名用药检索结果分类如下:当归，杜仲与桂心、牛膝，附子与防风、川芎，萆薜与独活、羌活、酒，芍药、炙甘草与干姜(芍药甘草汤，甘草干姜汤)、续断，木香与槟榔，石斛与白术。　　 2.形态学分析显示模型组出现特征性的腰椎间盘退行性改变，免疫组化染色发现椎间盘内II型胶原表达降低，X型胶原、IL-1β和TNFα表达增加；TUNEL染色发现凋亡细胞数量增加；β-半乳糖苷酶染色提示衰老细胞数目增加；Real-time RT-PCR分析发现ADAMTS-5、Co110α1、MMP3、MMP13、IL-1β、COX2、IL-6、iNOS和TNFα mRNA表达显著增加，Co12α1和aggrecan mRNA表达显著减少。　　 3.形态学藏红染色显示川芎嗪增加了直立7月后椎间盘高度，复方芪麝片和川芎嗪均可以防止纤维环撕裂和板层紊乱情况，增加软骨终板非钙化层胶原基质，防止终板变薄；免疫组化染色显示复方芪麝片和川芎嗪可以明显增加椎间盘髓核细胞外基质中II型胶原的蛋白表达，降低软骨终板X型胶原表达；实时定量RT-PCR分析发现复方芪麝片和川芎嗪在术后7月均可以显著增加Col2α1 mRNA的表达，降低MMP3、MMP13、COX-2、iNOS和IL-1β mRNA表达。　　 4.体外研究，川芎嗪(6.25-25μM)逆转IL-1β对大鼠终板软骨细胞增殖的抑制影响，抑制IL-1β诱导的软骨细胞IL-1β、TNF-α、COX-2和iNOS mRNA过量表达，逆转IL-1β对于Col2α1、aggrecan、MMP13和ADAMTS-5 mRNA表达的影响，增加IL-1β诱导后II型胶原的蛋白表达。　　 5.麝香酮抑制IL-1β诱导的大鼠终板软骨细胞IL-1β、TNF-α、COX-2和iNOS的mRNA表达，抑制IL-1β诱导的NO产生，逆转IL-1β对于Col2α1、aggrecan、MMP13和ADAMTS-5 mRNA表达的影响。除此之外，麝香酮(6.25-25μM)呈剂量依赖性显著抑制IL-1β诱导的ERK1/2和JNK的磷酸化。　　 结论:　　 1.明代以前腰痛用药规律首推活血化瘀、温阳散寒，其次为补肝肾、强筋骨，再次为益气渗湿，最后为祛风通络。石氏伤科主张“气血兼顾，以气为主，以血为先”的理伤观。在腰痛用药立法方面，石氏伤科与明以前医家均强调以活血化瘀、益气行气，两者一脉相承，而复方芪麝片治疗腰痛以益气化瘀立法，符合二者观点。　　 3.1月龄去双前肢大鼠直立诱导模型可以很好的模拟人类直立状态下椎间盘缓慢的退变过程，是比较理想的腰椎间盘退变模型。而且该模型椎间盘退变以凋亡和衰老细胞增加，细胞外基质的合成减少而降解增加，以及炎症因子表达增加为特征。　　 4.本研究证实复方芪麝片和川芎嗪均可以改善直立导致的腰椎间盘的退变情况，而川芎嗪和麝香酮可以有效防止IL-1β诱导的终板软骨细胞退变情况。由此可知，复方芪麝片、川芎嗪和麝香酮都能有效地防治腰椎间盘退变。