低聚葡萄籽原花青素对DOCA-高盐诱导的小鼠心血管重构的影响及机制研究

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目的:心血管重构是高血压重要的靶器官损伤,是导致许多心血管疾病发病率和死亡率升高的独立风险因素,深入探讨心血管重构的发生机制、提出新的防治策略仍是国内外心血管领域的一个研究热点。本实验旨在通过皮下注射去氧皮质酮(deoxycorticosterone acetate,DOCA)同时予高盐饮水复制DOCA-盐高血压心血管重构小鼠模型,探讨低聚葡萄籽原花青素对高血压心血管重构实验治疗作用及其可能的抗氧化应激信号转导机制。方法:皮下注射DOCA同时予高盐饮水复制DOCA-盐高血压小鼠模型。雄性昆明小鼠64只,体重23-26g,结扎肾动脉并切除左侧肾脏,术后随机分为8组:双肾对照组、单肾对照组、DOCA-盐高血压模型组、低聚葡萄籽原花青素(oligomericgrape seed proanthocyanidins,GSP)低剂量组(65mg/kg)、GSP中剂量组(130mg/kg)、GSP高剂量组(195mg/kg)、氨氯地平组(5mg/kg)和Tempol组(60mg/kg)。模型组、GSP各剂量组、氨氯地平组和Tempol组皮下注射DOCA(150mg/kg/周),每周2次,按0.025ml/10g/次给药,同时饮含1%氯化钠及0.2%氯化钾的盐水,持续4wk。GSP各剂量组、氨氯地平组和Tempol组分别予药物灌胃,每天1次,灌胃给药容积0.1ml/10g,对照组和模型组给予等容量纯水灌胃。实验结束后计算小鼠心脏重量指数以及肾脏重量指数,HE(hematoxylin eosin)染色和/或V-G(VanGieson)染色观察心脏、胸主动脉及肾脏病理形态学改变,离体血管环灌流方法观察胸主动脉环对乙酰胆碱(acetylcholine chloride,ACh)诱导的内皮依赖性血管舒张用的影响,比色法测定血清中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性、丙二醛(malondialdehyde,MDA)和一氧化氮(nitric oxide,NO)含量、心肌羟脯氨酸(hydroxyproline,Hyp)含量,Western Blot检测心肌组织中凋亡信号调节激酶-1(apotosis signal regulation kinase-1,ASK-1)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)和环氧化酶-2(Cyclooxygenase-2,COX-2)的蛋白表达水平。结果:与单肾对照组相比,DOCA-盐型高血压模型组小鼠心重指数、肾重指数、心肌细胞横截面积(cross-sectional area,CSA)、心肌胶原纤维、肾小球面积明显升高,胸主动脉中膜厚度明显增大,胸主动脉环对ACh引发的舒张作用明显减弱,血清MDA含量升高,SOD活性降低,NO含量减少,心肌组织Hyp含量以及凋亡信号调节激酶-1(ASK-1)、核因子-κB(NF-κB)和环氧化酶-2(COX-2)的表达明显上调。与模型组相比,GSP低、中、高剂量、氨氯地平和Tempol能明显抑制小鼠心重指数、肾重指数、CSA、胸主动脉中膜厚度以及肾小球面积的增加,心肌胶原沉积减少,胸主动脉环对ACh引发的舒张性明显增强,血清MDA含量降低,SOD活性和NO含量增加,心肌组织Hyp含量以及凋亡信号调节激酶1(ASK-1)、核因子-κB(NF-κB)和环氧化酶-2(COX-2)表达下调,并呈现出一定的剂量依赖性。结论:GSP能明显改善DOCA-高盐诱导的小鼠心血管重构和肾脏重构,其机制可能与干预ROS/ASK-1/NF-κB信号转导通路,降低机体氧化应激水平,保留NO生物学活性和改善内皮细胞功能紊乱有关。
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