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本文采用梯度稀释法和平板对峙法从不同生态土样中分离、筛选出对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌等病原菌具有拮抗作用的生防菌株,旨在获得更为安全、有效的生防菌株,取得以下结果:生防菌的分离从不同生态土样中分离纯化了细菌486株、真菌269株。采用平板测定法测定试验获得对水稻纹枯病菌、稻瘟病菌有不同程度抑制作用的拮抗细菌12株,真菌2株。其中拮抗细菌B4、B8、B18、B31、B34、B73和B74等菌株对稻瘟病菌菌丝生长抑制率均在80%以上,其培养液100%抑制稻瘟病菌孢子萌发;同时对水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌、大麦赤霉病菌(Fusarium graminearum)、草莓炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)和黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f. sp.cucumerinum)等多种病原真菌有较好抑制作用,经鉴定该组拮抗细菌为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。B1、B43和B44菌株对稻瘟病菌菌丝生长和孢子萌发有较好抑制作用,对水稻纹枯病菌具有一定的抑制作用,经鉴定为短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)。B48和B59为链霉菌(Streptomycetaceae),对稻瘟病菌的抑菌带明显,而对稻瘟病菌孢子萌发和附着胞的形成抑制作用不明显。拮抗真菌MF-91对水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌等具有较好的抑菌效果,其发酵液对稻瘟病菌孢子萌发及附着胞形成具有较强的抑制作用,经鉴定为金色毛壳菌(Chaetomium aureum)。生防菌MF-91生物学特性MF-91菌株适应范围较广,在多数培养基中都能够正常生长;其营养生长的最适条件为:在PDA培养基上,30-35℃,初始pH为9.0-11.0;在燕麦培养基上,25-30℃,初始pH为6.0-8.0条件下子囊孢子产量最高。生防菌MF-91发酵液对水稻病害的防治效果离体试验表明,MF-91发酵液对水稻纹枯病菌和稻瘟病菌的抑制作用显著,随着发酵液含量的增加抑制效果显著增加,当培养基中发酵液含量为10%时,完全抑制水稻纹枯病菌的生长和稻瘟病菌孢子萌发。盆栽防效和田间防效试验表明,MF-91发酵液对水稻纹枯病和稻瘟病存在一定的防治效果。不同条件对MF-91发酵液抑菌活性的影响以水稻纹枯病菌为靶标,对MF-91发酵液的收集时间、初始pH值,发酵液对光的稳定性、热稳定性和蛋白酶K稳定性的研究表明,MF-91发酵液在pH值为5.0-6.0,培养6d时,发酵液的抑菌活性最高。发酵液对温度较为稳定,对光照比较敏感,100℃温度处理对发酵液的抑菌活性影响较小,光照24h后,其抑菌活性下降50%,蛋白酶K对发酵液的抑菌活性影响较小。MF-91发酵液对水稻根际微生物多样性及稻米品质的影响利用PCR-DGGE分析发酵液处理对水稻根际真菌和细菌群落结构的影响,分析结果表明水稻同一生育期不同处理间土壤细菌和真菌,无论是优势种属还是多样性指数都较为相似,说明MF-91发酵液对水稻根际微生物多样性影响较小,对土壤原有的微生物群落结构是安全的。通过对稻米品质分析发现,低浓度MF-91发酵液对稻米品质影响较小,不存在显著性差异,而高浓度发酵液能够减少稻米垩白度,改善稻米品质。