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自“多莉”羊诞生以来,体细胞核移植技术获得不断完善。为了进一步完善绵羊体细胞核移植技术,本研究利用来源于屠宰场的绵羊卵巢,探讨了获取大量GV期卵母细胞的方法及不同分级的卵母细胞的体外成熟效率。在此基础上,探讨了卵母细胞成熟时间、供体细胞来源和供体细胞的饥饿处理对细胞核移植效率的影响。与此同时,探讨了激活时间和不同培养液对重构胚发育的影响。本研究为开展绵羊体细胞核移植的相关研究奠定了基础。通过本研究获得了如下的结果：1.不同采卵方法在采卵效率上存在差异。从屠宰场获得的绵羊卵巢采用抽吸法平均每个卵巢可获得1.39个GV期卵母细胞,相比之下采用切割法,平均每个绵羊卵巢可获得4.37个GV期卵母细胞；2.采集的具有3层以上卵丘细胞的卵母细胞,其体外成熟率可达90.6%,显著高于具有3层以下和不具有卵丘细胞的卵母细胞的体外成熟率(分别为46.0%和0.0%)；在体外成熟液中添加HEPES,并未显著提高绵羊GV期卵母细胞的体外成熟率；3.与体外成熟时间18-20h组的成熟率(50.9%)相比,体外成熟时间为21-23h和24-26时成熟率(分别为62.1%和71.3%,P<0.05和P<0.01)显著提高,且采用24-26h成熟时间可获得最高的卵裂率(73.0%)和桑椹胚率(37.2%)；4.绵羊成纤维细胞是否进行饥饿处理体细胞核移植的效率没有影响；绵羊颗粒细胞和成纤维细胞的细胞核移植效率间差异不显著；5.使用6-DMAP对细胞核移植获得的重构胚分别进行2h、3h和4h激活,其重构胚的卵裂率(分别为69.2%、70.5%和65.0%)和重构胚的桑椹胚率(分别30.8%、32.1%和31.1%)间差异不显著；采用培养液I和培养液II对重构胚进行培养,重构胚发育至桑椹胚的比率(分别为32.8%和29.1%)差异不显著。综上所述,本研究进一步完善绵羊体细胞核移植方法,为开展绵羊体细胞核移植的相关研究奠定了坚实基础。