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研究背景 脓毒症(sepsis)是由感染引起的全身炎症反应综合症，如伴发器官功能衰竭时则称为重症脓毒症(severe sepsis)，是ICU病人中最常见的死亡原因。尽管抗感染治疗和生命支持治疗取得了很大进展，但重症脓毒症的发病率和死亡率仍居高不下。近年来研究表明，革兰氏阴性杆菌产生的内毒素(lipopolysaccharide，LPS)在脓毒症的发病过程中起关键作用，脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein，LBP)及其受体CD14在识别和调整内毒素方面起重要作用。CD14包括可溶性CD14(soluble CD14，sCD14)和结合于单核细胞、巨噬细胞、多形核白细胞等细胞膜表面的膜结合CD14(membrane CD14，mCD14)。LBP具有酶催化作用，它能把LPS聚集体变成LPS单体转运给mCD14或sCD14，从而大大增加CD14介导的LPS反应。此外，sCD14和LBP都可将LPS转运给高密度脂蛋白(HDL)，以减弱其作用。国外资料报道，脓毒症患者血清中LBP和sCD14浓度均明显升高，且与疾病的严重程度及预后有一定关系，而国内此方面报道甚少。 研究目的 观察重症脓毒症患者中血清LBP和sCD14含量变化，探讨两者与疾病严重程度及预后的关系。浙江大学硕士学位论文研究方法实验组按1991年美国胸科/重症监护协会提出的重症脓毒症诊断标准选择患者共41名，其中男28例，女13例，年龄31一81岁，平均(59.9士16.4)岁。患者入选后即记录病史及主要体检结果，并进行APACHEU评分:在发病(指达到重症脓毒症诊断标准)24小时内行血清前降钙素(Procalcitonin，PCT)和LPS测定(送浙江大学医学院附属第一医院传染病研究室测定);并于发病24小时内，第2、3、6天分别抽取挠动脉血ZmL于试管中，然后静置析出血清，室温下20009离心20分钟，取上层血清，置入一20℃冰箱保存待测:抽血同时行血常规、肝肾功能、血气等检查，并取可疑标本进行培养，记录28天后的转归(死亡或存活)。对照组为同期门诊健康体检者，共20例，其中男12例，女8例，年龄29一80岁，平均(62.9士14.6)岁。两组相比，性别和年龄构成无显著差异(P)0.05)。对照组仅抽血一次，同样方法保存。血清LBP和sCD14均采用酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定，所用试剂盒均系HyCult生物公司产品，由北京晶美生物工程有限公司提供。移液器由美国Eppendof公司生产。自动洗板机是由美国620一RAD公司生产的model 1575。自动酶标仪由德国Humareader生产。LBp、sCD14的测定灵敏度分别为ing/ml、Zng/mL。血清PCT水平检测应用免疫荧光分析法，采用LUMItest PCT试剂盒。它包含两种抗原特异性的单克隆抗体，其中一种有荧光标记，它们与PCT的两个不同的结合位点结合后形成“夹心复合体”，再用适当的荧光计对发出的荧光进行定量分析。分析检测灵敏度接近0.Ing/ml。内毒素测定采用堂试剂与合成基质(堂三肤)的偶氮显色法来定量检测样品中微量革兰氏阴性杆菌内毒素。研究结果本实验组共入选患者41名，其中肺部感染28名，腹膜炎名，胆道感染4名，细菌性心内膜炎l名，破伤风1名:微生物培养阳性38例，浙江大学硕士学位论文其中革兰氏阳性球菌8例，革兰氏阴性杆菌18例，真菌6例，混合感染6例;28天后有10人死亡，死亡率为24.4%(10/41):APAcHE 11评分为9一38分，平均(18.8士6.5)分。实验组血清LBP、sCD14水平在发病24小时内即明显升高，第二天达到高峰随后渐下降，死亡组和存活组的LBP动态变化略有差别，而sCD14基本无差别。第l、2、3、6天的血清LBP水平分别为(10.23士6.73)ug/m1、(10.60士7.87)ug/ml、(9.46士6.41)ug/ml、(8.67士4.18)ug/ml较正常对照组(2.92士2.41)ug/ml显著升高(P<0.01):同期血清sCD14水平分别为(2.40土1 .62)ug/ml、(2.70士1.80)ug/ml、(2.41土1.39)ug/m1、(2.17士1.32)ug/ml与正常对照组(1.62士0.47)ug/ml相比也显著升高(P<0.01)。各种微生物所致感染中血清LBP和sCD14水平均无显著差异。死亡组各时点血清LBP水平比存活组略有升高，但两者差异无显著性(P>0.05);而死亡组第1、2、3、6天的血清sCD14水平分别为(3.39士1.41)ug/ml、(3.72士1.88)ug/ml、(3.32士1.14)ug/ml、(3.00士0.90)ug/ml均较存活组同期水平(2.04士1.56)ug/ml、(2.33士1.65)ug/ml、(2.07土1.33)ug/ml、(1.90士1.33)ug/ml显著升高(P(0.05)。实验组血清L即水平(发病24小时内)与PCT无显著相关(r二一0.139，P二0.547)，与APACHEll评分也无显著相关(r二一0.097，P=0 .545)，与LPS则显著正相关(r=0.507，P二0.019);实验组血清sCD14水平(发病24小时内)与PCT呈非常显著正相关(r=0 .649，P二0.001)，与APACHEH评分也有非常显著的正相关关系(r== 0.408，P二0.008)，与LPS则无显著相关(r二一0.007，P二0.975)。实验组血清比P水平和肝功能的各指标均无显著相关(P>O.05):但血清LB户和sCD14浓度有显著正相关(r=0 .4朋，p=0 .003)。结论重症脓毒症患者血清LBP和scD14浓度明显升高，在第二天达到浙江大学硕士学位论文高峰后渐下降。廿S与LBP呈正相关关系，提示廿S是促进LBP合成、释放的重要因素之一。LBP可反映?