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背景:绞股蓝(Gynostemma pentaphyllum Makino)植物在我国约有11种,其中所含的化学成分丰富。近年来经国内外学者研究证明,绞股蓝含有丰富的人参皂甙,如人参皂甙Rb1、Rb3、Rd、F2、K和Rg3;多种人体必需的氨基酸和微量元素,如锗、硒、锌。绞股蓝具有抗衰老、抗溃疡、抑制癌细胞增殖、增强机体免疫力等多种生物功能,特别是其抗衰老作用日益引起关注。但是,绞股蓝在DNA分子水平的抗衰老作用及其对细胞凋亡的影响的研究却少有报道。 目的:观察不同剂量绞股蓝提取物抗氧化、延缓机体衰老的效果,检测其对DNA损伤和细胞凋亡的影响。以便从分子生物学水平探讨绞股蓝提取物延缓衰老的机理,研究剂量-反应关系,为绞股蓝保健功能的开发应用提供科学依据。同时拟对本论文所采用的DNA损伤检测方法进行初步分析,为今后开展DNA损伤的分子流行病学研究提供方法学参考。 方法:采用成年Wistar大鼠(3~4月龄)94只,雌雄各半,体重190~245克。基础饲料适应性喂养1w后,随机分为6组,每组14~16只,分别为正常对照组、衰老对照组、维生素E+维生素C组(以下简称维生素EC组)、绞股蓝1组、绞股蓝2组和绞股蓝3组。除正常对照组外,其余各组大鼠每日颈背部皮下注射D-半乳糖100mg/kgBW以建立衰老动物模型,正常对照组皮下注射等量的生理盐水。正常对照组和衰老对照组大鼠喂饲基础饲料,维生素EC组在基础饲料中添加维生素E200mg/kg饲料和维生素C1000mg/kg饲料;绞股蓝1、2、3组分别添加绞股蓝提取物200mg/kg饲料、800mg/kg饲料和4000mg/kg饲料。实验期为8周,大鼠自由进食及饮水。实验过程中,定期称大鼠体重,第7周留取尿液。实验结束后腹主动脉取血进行各项指标的检测分析。 1.大鼠抗氧化能力测定:采用试剂盒测定血浆中超氧化物歧化酶(SOD)、