异基因造血干细胞移植(Allo-HSCT)是治疗恶性血液肿瘤,如白血病、淋巴瘤等的有效治疗手段。患者移植后往往伴随着长期的免疫缺陷,这会导致由机会性感染和疾病复发所引起的较高风险的死亡率。因此,如何加快移植后患者造血和免疫重建是本领域的研究热点。患者蛋白营养不良是移植后非常普遍的现象,可能会造成造血恢复和免疫重建的延迟。目前的研究中,针对单一类型蛋白临床营养支持在骨髓移植中的作用已有相关报导,但不同动植物来源的双蛋白是否能够加快移植后造血及免疫重建尚未有相关研究报道。本研究通过建立异基因造血干细胞移植小鼠模型,并在移植后补充动植物优质蛋白(大豆分离蛋白和乳清蛋白)的混合蛋白—即双蛋白,初步探究了双蛋白营养补充对移植后小鼠造血及免疫重建的影响。试验1:异基因造血干细胞移植小鼠模型的建立及评价设置受鼠BALB/c(H-2K~d)两个全身辐照(Total body irradiation,TBI)剂量(7.5Gy、8Gy),及供鼠C57BL/6(H-2K~b)来源的骨髓单个核细胞(BMNCs)两个移植数量(5×10~6、2×10~7)组,摸索骨髓移植小鼠模型建立条件。分组如下:RHTH(8Gy辐照+2×10~7 BMNCs输注);RHTL(8Gy辐照+5×10~6 BMNCs输注);RLTH(7.5Gy辐照+2×10~7BMNCs输注);RLTL(7.5G辐照+5×10~6BMNCs输注);RHNT(8Gy辐照);RLNT(7.5Gy辐照)。移植后主要观察各组小鼠生存状态、存活率、GVHD表现及供体嵌合情况。结果表明:两个辐照剂量都能达到清髓目的,但8Gy全身辐照和5×10~6个BMNCs输注,即RHTL组小鼠死亡率最低且供体嵌合率均达到完全植入状态。此外,各移植组小鼠均未出现明显的GVHD现象。因此,8Gy全身辐照和5×10~6个BMNCs输注是较好的模型建立方案。试验2:双蛋白干预对移植后小鼠造血及免疫重建的影响150只BALB/c小鼠随机分为双蛋白干预组(DP)、乳清蛋白干预组(WP)、照射移植未干预组(NP)、照射未移植组(RNT)、正常对照组(CON)。根据蛋白质在生理盐水的溶解度和氮素平衡原则,以1.5mg/kg.d的灌胃剂量,DP和WP组小鼠在移植后分别给予34mg双蛋白和33.3mg乳清蛋白的营养支持。移植后第1天开始进行蛋白营养干预,干预4周,综合评价蛋白营养干预后各组小鼠造血及免疫重建状况。结果表明:移植后DP组小鼠白细胞、B淋巴细胞及NK细胞的恢复显著快于NP组,且淋巴细胞和NK细胞的恢复显著快于WP组;DP组小鼠骨髓中c-Kit+细胞、短期造血干细胞(ST-HSC)、多潜能祖细胞(MPPs)数量显著高于NP组,且短期造血干细胞(ST-HSC)数量显著高于WP组;DP组小鼠胸腺和脾脏的脏器指数和绝对细胞计数及脾脏CD3+和B220+细胞数量均明显高于NP组,而WP和NP组间无明显差异。试验3:双蛋白干预对移植后小鼠血清生化指标及GVHD的影响通过定期测定小鼠体重及观察记录小鼠体貌体征的变化过程、H&E染色分析小鼠肝脏、肠道及脾脏病理状况及血生化指标分析,进一步评价双蛋白干预对移植后小鼠机体状态及GVHD发生的影响。结果表明:各移植组小鼠存活率较高,无明显GVHD现象发生,且DP和WP与NP组之间无明显差异;血生化指标表明,DP组血清总蛋白含量显著高于WP和NP组;与NP组相比,DP和WP组血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)含量明显降低;同时,DP和WP组血清丙二醛(MDA)、4-羟基壬烯醛(4-HNE)含量较NP组显著降低。因此,双蛋白干预对移植后小鼠存活率及GVHD发生无明显影响,但能够明显增加移植后早期血清总蛋白含量,提高机体抗氧化能力,保护肝脏功能。