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目的研究HBV促进miR-181a表达的机制，以及miR-181a上调对肝癌发生发展的影响。方法1.运用qRT-PCR比较HepG2和HepG2.2.15细胞及表达HBV腺病毒感染后的HepG2细胞（Ad-HBV-HepG2）和表达GFP腺病毒感染后的HepG2细胞（Ad-GFP-HepG2）中miR-181a的表达差异。2.构建miR-181a启动子荧光素酶报告质粒，分别转染入HepG2和HepG2.2.15细胞，Ad-HBV-HepG2和Ad-GFP-HepG2细胞。用双荧光素酶报告分析系统检测miR-181a启动子活性，以了解HBV对miR-181a启动子活性的影响。3.将构建的miR-181a过表达质粒和miR-181a inhibitor分别转染入SMMC7721细胞中，运用MTS检测miR-181a过表达和干扰后肝癌细胞增殖的影响。同时用MTS比较miR-181a过表达的稳定细胞系p-miR-181a和其对照p-control细胞增殖情况。4.通过miRNAs靶基因预测软件，如TargetScan和MiRanda初步筛选一些与肿瘤发生发展相关的基因。构建靶基因3’末端荧光素酶报告质粒，运用双荧光素酶报告分析系统分析miR-181a对这些靶基因的影响。5.运用qRT-PCR和Western Blot检测SMMC7721细胞中过表达和干扰miR-181a后E2F5的表达变化。6.运用MTS和克隆形成实验检测在SMMC7721细胞中干扰E2F5后细胞的增殖情况。7.运用qRT-PCR和Western Blot检测HBV对E2F5表达的影响，以及MTS验证HBV对肝癌细胞增殖的影响。并且通过MTS和克隆形成实验检测miR-181a inhibitor转染后的HepG2.2.15细胞的生长情况。8.通过裸鼠皮下成瘤实验进一步验证miR-181a和E2F5对肝癌细胞增殖的影响。结果1. HBV通过增强miR-181a启动子活性上调miR-181a的表达。2. miR-181a能促进肝癌细胞增殖。3. E2F5是miR-181a的靶基因。4. E2F5参与miR-181a所诱导的肝细胞增殖。5. HBV下调E2F5的表达。6. miR-181a促进裸鼠皮下肝癌细胞成瘤。结论HBV在肝癌细胞中上调miR-181a的表达促进肝细胞肝癌的形成可能是通过E2F5实现的。这表明miR-181a在肝细胞肝癌的发生发展中起到了重要作用。