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疟疾是全球死亡的一个主要病之一。大部分针对疟疾的快速诊断试剂不能区分来自于不同疟原虫的感染。开发灵敏度高且能区分两种最常见疟原虫感染的快速诊断试剂对于疾病的控制和治疗有重要的意义。本文以提取的间日疟原虫DNA为模板,通过PCR扩增了醛缩酶基因(PvALDO)并成功构建pET30a-Aldo原核表达质粒,成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并使用亲和层析法纯化得到了纯度高于95%的重组间日疟原虫醛缩酶蛋白。用重组蛋白对小鼠和兔子进行免疫用于生产抗体。将生产得到的兔多克隆抗体使用在一种新型抗体捕获ELISA法进行杂交瘤细胞的筛选,一共筛选得到九个稳定的单克隆抗体(1C3,1G3,1H3,3F1,9A1,9B5,9G6,11G7,12F10),将得到的单克隆抗体用作包被抗体或者标记抗体在胶体金免疫层析平台进行评价。把实验结果最好的抗体对(1C3-12F10)用于开发商业化的间日疟原虫检测快速诊断试剂并对其检测效果进行评估。对来自云南和广州的临床血液样本(n=503)的评估结果表明我们的快速诊断试剂针对间日疟原虫的特异性为100%(95%Confidence Interval (CI):99.12to100.00%),与显微镜镜检法相比灵敏度为98.75%(95%CI:93.20to99.79%)且其中仅出现一例假阴性。同时对恶性疟原虫样本(n=33)和健康人血液样本(n=390)的检测没有发应。我们的快速诊断试剂的阳性预测值(PPV)以及阴性预测值(NPV)分别为100.00%和99.76%,检测的置信区间为95%,与显微镜镜检法有很好的相关性(kappa值,K=0.992530).针对重组间日疟原虫醛缩酶蛋白,胶体金检测试纸条的灵敏度能达到6.25ng/ml。本文阐明了以醛缩酶蛋白作为检测指标的快速诊断试剂区分不同疟原虫引起的疟疾感染是可行的。开发得到的快速诊断试剂能有效区分间日疟原虫感染和恶性疟原虫感染,同时本文采用的新的抗体筛选方法可以在其他抗原高特异性单克隆抗体的筛选过程中得到运用。