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栀子是一味传统中药。栀子黄和栀子苷存在于栀子的成熟果实中。栀子黄属于自然界罕见的水溶性类胡萝卜素类天然色素,具有无毒、安全性好、着色力强的特性,因此广泛用于食品、制药和其它行业。栀子苷是栀子中保肝利胆、抗炎的主要成分。为实现栀子的综合开发利用,提高产品的附加值,本论文对栀子果实中栀子黄色素、栀子苷提取、分离工艺和制备栀子蓝色素的工艺及蓝色素稳定性进行了研究。研究结果如下:
1.栀子黄色素与栀子苷提取工艺
确定了栀子黄色素与栀子苷的浸提条件:栀子果实粗粉(过20目筛),在50℃下,水浸提,浸提时间60min,浸提3次,料液比1:20(三次不同加液量比为5:4:3),栀子黄色素的提取率为83.4%,栀子苷的提取率为89.2%。
2.栀子黄色素与栀子苷分离工艺
通过对树脂静态吸附的研究,考察了5种吸附树脂对栀子黄色素的吸附容量和选择性,确定了以大孔树脂AB-8为栀子黄色素与栀子苷分离介质;用分光光度法,通过对栀子黄色素与栀子苷在大孔树脂AB-8柱的吸附与解吸附条件研究,确定了分离栀子黄色素与栀子苷的工艺为:树脂的吸附量为含生药量4g/g,工作液浓度为含生药量50mg/mL,吸附流速为1.5mL/min,洗脱流速为2mL/min;蒸馏水洗脱除杂,30%乙醇溶液洗脱栀子苷,80%乙醇溶液洗脱栀子黄色素。该工艺栀子苷的洗脱率为74.4%,栀子黄色素的洗脱率为85.4%。所得栀子黄色素色价为186.2,OD(A238/A440)值为0.85。
3.栀子苷的纯化工艺
树脂吸附后流出液与30%乙醇洗脱的栀子苷溶液合并,浓缩,硅胶柱层析纯化栀子苷,洗脱剂为氯仿:甲醇=3:1,氯仿-甲醇重结晶,得到栀子苷产品纯度为99.89%(高效液相色谱法测定)。
4.栀子蓝色素制备工艺
栀子蓝色素制备工艺最佳反应条件为:1mg/mL栀子苷溶液100mL,加入酶液1.5mL(β-葡萄糖苷酶酶活811.1U/mL),5%谷氨酸钠,pH5.0,反应温度50℃,反应24h,可得色价为68.3的栀子蓝色素。
5.栀子蓝色素稳定性研究
栀子蓝色素对酸碱有较高的稳定性,在pH2~10内均呈亮蓝色;对热稳定性好,在40~100℃加热10h蓝色素不受热分解或变色,但耐光性差,宜避光保存;金属离子Cu2+、Fe3+对栀子蓝色素有不良影响;蓝色素对氧化剂H2O2较稳定,但在H2O2浓度高于0.2mol/L时有一定影响;对常用食品添加剂,NaCl、糖、苯甲酸钠、山梨酸有较好的耐受性。因此,桅子蓝色素具有良好的理化稳定性。