蔗糖-6-乙酯是原酸酯法合成三氯蔗糖的重要中间体。利用酶催化转酯化反应具有催化效率高,区域选择性高,反应条件温和等优点,因此成为当前研究的热点。本文是以假丝酵母脂肪酶为催化剂,对催化合成蔗糖-6-乙酯的反应工艺进行了研究。通过用包衣剂对酶进行修饰和改变反应介质等方法,提高转酯化反应的酯化率和区域选择性。首先,探索了表面活性剂存在下,在水-有机两相体系中脂肪酶催化合成蔗糖-6-乙酯的反应。在两相体系中加入表面活性剂后会形成胶束溶液,我们发现加入的最适表面活性剂为十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),脂肪酶在胶束体系中催化合成蔗糖-6-乙酯比在两相体系中酯化率提高了 20%左右,区域选择性也有所提高。同时优化了反应条件。在最优反应条件下,所得蔗糖乙酯的酯化率为70.2%,6位选择性为54.0%。其次,对脂肪酶先用表面活性剂进行包衣修饰,再用溶胶凝胶固定化。将溶胶凝胶固定化表面活性剂包衣酶用于在有机溶剂中催化合成蔗糖-6-乙酯。我们选取表面活性剂聚氧乙烯脱水山梨醇单油酸酯(吐温-80)作为包衣剂,对凝胶前体用甘油进行了改性,探索了包衣修饰和凝胶固定化酶过程中的工艺,优化了反应条件。结果发现,相比于游离酶,固定化的包衣脂肪酶在反应体系中的稳定性大大提高了,催化反应所得到的酯化率提高了 10倍,达到73.9%,区域选择性则达到了 96.2%。固定化包衣酶重复利用5次后,仍然能保持较高的催化活性。最后考察了在微水相中利用溶胶凝胶固定化表面活性剂包衣酶催化合成蔗糖-6-乙酯。研究了三种反应介质:1)叔戊醇与二甲基亚砜混合溶剂的微水相介质,2)叔戊醇微水相介质,3)仲丁醇微水相介质。我们发现相比于纯有机相,在微水相中蔗糖溶解的量大大增加了,固定化包衣酶的催化活性也有所增加,这使得该体系更适合工业化应用。