多功能诊疗一体化纳米探针USPION@Bn在前列腺癌中的应用

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目的:制备并表征超小超顺磁性氧化铁颗粒@蛙皮素(Ultrasmall superparamagnetic iron-oxide nanoparticles@bombesin,USPION@Bn)多功能诊疗一体化纳米探针,并探讨用于前列腺癌(Prostate cancer,PCa)的磁共振(Magnetic resonance,MR)分子成像及MR介导下光热治疗(Photothermal therapy,PTT)的可行性。方法:(1)制备USPION并偶联Bn制备USPION@Bn纳米探针,并对其性质进行表征测定。(2)MTT法进行USPION@Bn的体外细胞毒性试验;对比USPION@Bn、USPION分别与PC-3细胞共培养后的磁共振成像(Magnetic resonance imaging,MRI)增强效果,评价USPION@Bn的体外成像能力;采用钙黄绿素-AM(Calcein-AM)/碘化丙啶(Propidium iodide,PI)染色研究USPION@Bn对PC-3细胞的PTT能力。(3)PCa荷瘤裸鼠尾静脉注射USPION@Bn,MR动态监测肿瘤区域的成像效果并测量T2加权像(T2 weighted image,T2WI)的信号强度(Signal intensity,SI);应用808 nm近红外(Near infrared,NIR)激光对荷瘤裸鼠的肿瘤进行局部照射并监测肿瘤体积变化。结果:(1)透射电镜(Transmission electronic microscopy,TEM)显示USPION呈球形、粒径约为6 nm、具有较好的单分散性;X射线衍射分析(X-ray powder diffraction,XRD)证实USPION核心为Fe3O4颗粒;USPION的磁滞回线为重合“S”型曲线,矫顽力为零,具有超顺磁性;弛豫率为85.3 mM-1S-1;傅立叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectrum,FT-IR)结果证实成功制备USPION@Bn;UV-Vis-NIR吸收光谱显示USPION@Bn在近红外区光学吸收强,且吸收值具有浓度相关性。USPION@Bn的热动力学特征:在808 nm的NIR光(3.0 W/cm2,10 min)照射下,其升温能力与浓度成正相关,1 mg/mL的USPION@Bn可升温19.9℃。(2)MTT法证实USPION@Bn的浓度在200μg/mL以下时,细胞存活率均>90%,表明其生物相容性良好;体外靶向结合成像结果显示USPION@Bn和USPION与PC-3细胞共培养后,SI均降低,但USPION@Bn组比USPION组SI降低程度更明显,且差异具有统计学意义;Calcein-AM/PI双重染色直观显示USPION@Bn可有效杀死肿瘤细胞。(3)成功建立PCa裸鼠模型,肿瘤区域的SI在USPION@Bn注射后比注射前明显降低,且差异有统计学意义;肿瘤PTT结果显示USPION@Bn在NIR光照射下可有效抑制肿瘤的生长,且治疗前后肿瘤体积差异有统计学意义。结论:本研究成功制备生物相容性良好的USPION@Bn纳米探针,且具有较好的MR靶向成像能力及较好的光热转换能力,可同时实现PCa的体内靶向MRI及PTT,表明USPION@Bn可作为PCa诊疗一体化纳米材料。
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