本文选取饮用水消毒副产物中的三氯甲烷为研究对象,采用荧光光谱分析法,测定了三氯甲烷与过氧化氢酶及其酪氨酸、色氨酸之间的作用,以及pH值和金属离子对其结合的影响。 荧光分析结果说明,随着体系中三氯甲烷浓度不断增加,会引起过氧化氢酶荧光有规律地猝灭,可能由于两者结合形成稳定的基态络合物并引起过氧化氢酶构象改变的结果。铜、铁离子也会使过氧化氢酶荧光猝灭,过氧化氢酶与铜、铁离子的结合能力远大于与三氯甲烷的结合,过氧化氢酶与铜的结合常数是过氧化氢酶与三氯甲烷结合常数的32倍,与铁的结合常数是过氧化氢酶与三氯甲烷结合常数的141倍。三氯甲烷、金属离子主要是与过氧化氢酶中的蛋白质部分发生作用,而对过氧化氢酶的辅基部分铁卟啉的荧光光谱基本没有影响。 金属离子对过氧化氢酶与三氯甲烷结合的影响不同。铜离子的存在会影响过氧化氢酶与三氯甲烷的结合,随着铜离子浓度的增加,过氧化氢酶与三氯甲烷的结合强度降低,这可能由于铜的存在改变了过氧化氢酶与三氯甲烷的结合位点。铁离子的存在基本未改变过氧化氢酶与三氯甲烷的结合,随着铁离子浓度的增加,过氧化氢酶与三氯甲烷的荧光光谱基本没有发生变化。 不同pH值条件会影响过氧化氢酶与三氯甲烷的结合,实验表明,在pH7.2条件下过氧化氢酶与三氯甲烷结合最强,而在酸性或碱性条件下,其结合强度都会降低。 为进一步研究三氯甲烷对过氧化氢酶的影响,进行了过氧化氢酶的活力测定,结果表明三氯甲烷对过氧化氢酶的活力有影响,低浓度三氯甲烷对过氧化氢酶有激活作用,高浓度三氯甲烷对过氧化氢酶有抑制作用,并不呈线性变化,而荧光光谱法所测发射光谱变化却表现线性规律。这表明,三氯甲烷对过氧化氢酶作用可能除了使其构象发生变化外,还可能通过其它机理影响到其催化基团或结合基团。 荧光分析表明三氯甲烷会引起酪氨酸、色氨酸荧光有规律的猝灭,铜、铁离子也会引起酪氨酸、色氨酸荧光猝灭,而且色氨酸、酪氨酸与金属离子的结合常数远大于与三氯甲烷的结合常数,但是金属离子的存