前言 癫痫是脑细胞过度放电引起的反复发作的突然而暂时的脑功能紊乱，是常见的神经内科疾病之一。目前由于抗癫痫西药的作用有限，所以越来越多的人们开始关注于抗癫痫中药的研究。以往的动物实验及临床观察已证实了蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星具有镇惊、熄风、豁痰、顺气等抗癫痫作用，但由这四味药组成的复方对遗传性癫痫大鼠的失神样小发作是否具有对抗作用并未见报道。而且以往多以化学致痫剂或电刺激等方法造模进行抗癫痫药物的研究，但在临床的癫痫患者中遗传因素占有相当大的比例，所以本实验应用了从日本引进的具有遗传性癫痫小发作的震颤大鼠作为实验动物模型，通过在震颤大鼠脑皮质和海马慢性安插电极后进行脑电图的记录，观察以蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星四味药为主的复方中药制剂对震颤大鼠癫痫小发作的抑制作用。同时，通过纸电泳和紫外分光光度法对震颤大鼠脑海马内GABA含量进行测定，观察中药复方对震颤大鼠脑GABA能抑制系统的影响。 方法 1．震颤大鼠的筛选 剪大鼠尾尖装入微离心管中，加入尾缓冲液及蛋白酶k，涡旋后55℃水浴过夜。过夜后的样品以tris平衡酚和氯仿进行分离，提取DNA。将DNA样品加入PCR工作液进行扩增。取扩增后的模板与载体缓冲液混合，在灌好的琼脂糖凝胶中加样、水平电泳。电泳结束后对凝胶进行图像分析，筛选出震颤大鼠。 2．大鼠脑皮质和海马慢性安插电极技术 取14-18周龄的震颤大鼠18只，将其随机分为3组：A组为生理盐水组中组为丙戌酸钠组N．036 g／kgX人组为中药复方组根．42 g／kg人每组 6 ／q大鼠。动物用 3％的戊巴比妥钠按 40mg／kg腹腔注射麻醉，背位固定于立体定位仪上，切开眼一耳间中线皮肤，刮净肌肉及骨膜，止血、消毒。在距前囱（－3 mm，3 mm）橱 nun，3 mm（－2 nun，－4 mm）三处钻孔，依次安插皮质电极。参考电极和海马电极，将机体地线埋人皮下。最后用牙托粉包埋电极。 3．脑电图的测定 术后一周用多导生理记录仪对大鼠进行给药前的脑电图的测定。然后A，B人三组按10 rnl／kg分别灌胃生理盐水、丙戊酸钠和中药复方，每天灌胃两次，连续灌胃六天。并记录给药sd后lh。给药6d后lh、停药id．Zd．3d．4d后的脑电图，每次均连续记录 15 mln。 4．震颤大鼠脑海马内GABA含量的测定 将大鼠分为 4组：D组为正常大鼠对照＊ormal control，NC）组上组为未经给药的震颤大鼠模型对照（model col血ol，M）组。F组为震颤大鼠给丙戌酸钠（VPA）组人组为震颤大鼠给中药复方（TC M C）组，每组6只大鼠。各组大鼠断头，取脑海马，加预冷的生理盐水。匀浆，三次离心后，取上清作为纸电泳样品。在滤纸条上湿法点样，犯OV恒压电泳叨I。Ih后，吹干滤纸条，显色剂喷雾湿润，再吹干，显色。剪色带于 85％的乙醇中浸泡2 h。用 722型紫外分光光度计测 GABA的吸光度 A。 结 果 1．各组对震颤大鼠平均每次癫痛小发作持续时间的影响 丙戊酸钠对震颤大鼠平均每次癫痛小发作持续时间的抑制作用很明显瞩＜0．0门，在给药sd后二h及6d后二h分别降到给药前的u8。7）％和门。6）％。中药复方对其的抑制作用也非 ·2·常明显瞩＜0．0 l），在给药 6 hi后 lh及停药 l在J户 d后分别降到给药前的门 士9）阮、（47 f：9）呢、（52 L 11）阮、（59 L 15）％及（68 LIS）呢。 2．各组对震颤大鼠15 min内癫痛小发作的总持续时间的影回 丙戊酸钠对震颤大鼠15 min内癫痛小发作的总持续时间的抑制作用在给药5 d后lh及6 d后lh分别为给药前的K9。16）％及门0。19）％（P＜O．05人 中药复方对其的抑制作用很明显，在给药6 d后lh及停药］．在J d后分别降到给药前的万5 L16）呢、（如土12）阮、（53土1二）院及（61土30）呢（P＜O．0二）。 3．各组对震颤大鼠15 t。n内癫痛小发作的总次数的影响 中药复方和丙戊酸钠对震颤大鼠 15 min内癫痫小发作的总次数均无明显的抑制作用瞩〕。0．05人 4．中药复方与丙戊酸钠对震颤大鼠脑电图各指标影响的比较 中药复方和丙戊酸钠在给药sd后lh及6d后lh对震颤大鼠平均每次癫痫小发作的持续时间及15 min内癫痛小发作的总持续时间的抑制作用无显著性差异（P＞0．05人 5．中药复方与丙戌酸钠对震颤大鼠脑海马内GABA含量的影响 丙戌酸钠和中药复方与模型对照组比较均可明显提高震颤大鼠脑海马内GA＊A的含量（P·＜o．01入其值分别提高为N．103。0．021）％及（0．075 do．018）％。。 讨 论 中医辨证认为癫痛是风痰闭阻y心肾亏虚、气血瘀滞引起的，因此用药以镇惊、熄风、豁痰、顺气、化瘀为主。本实验以祛风解痉、化痰散结、清热平肝为原则将蜈蚣、僵蚕、钩藤、制南星四味药 ·3·组成复方，观察其对震颤大鼠癫痛小发作时?