不同培养料对灵芝生物转化的影响及其机制的研究

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灵芝(Ganoderma lucidum)富含三萜、多糖等多种活性物质,具有增强免疫力、抗肿瘤、抗氧化、保肝等功效,是一种名贵的食药用菌,传统栽培方法为木屑栽培。为了节约原料成本,减缓菌林矛盾,本文探索了巨菌草及其沼渣栽培灵芝的可行性,做了如下工作:1)筛选出适合巨菌草及其沼渣栽培的灵芝品种本章以5种灵芝菌株为实验材料,分析它们在不同比例巨菌草沼渣培养基中的菌丝生长速度和出芝情况,结果显示韩芝最适合在巨菌草沼渣培养料中生长。2)筛选出适合韩芝栽培的配方本章研究了5种不同配方培养料对韩芝生长情况,产量,营养成分,子实体重金属含量的影响,并选取菌丝生长速度、产量、多糖和三萜4项指标进行灰色关联度分析,进而对这5种培养料栽培韩芝的效益进行综合评价。结果表明:配方1(以木屑和沼渣为主料)栽培韩芝的综合效益最高,配方3(以巨菌草为主料)栽培韩芝可以维持较高的综合效益。3)探讨不同培养料对韩芝胞外酶活性的影响本章通过对5种不同培养基质栽培灵芝过程中漆酶、锰过氧化物酶、羧甲基纤维素酶和半纤维素酶等胞外酶在菌丝生长20天,满袋期,原基期,子实体成熟期等4个不同生长阶段的活性大小进行测定。结果表明漆酶、锰过氧化物酶、羧甲基纤维素酶和半纤维素酶等灵芝胞外酶在韩芝的生长发育过程中呈现动态变化,且不同的栽培基质显著影响这些胞外酶的活性大小。4)不同灵芝培养料及其菌糟营养成分对比分析本章测定了 4种不同培养料在接种前与子实体采摘后的粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、粗灰分以及氨基酸等常规营养成分。结果表明:这4种不同培养料在经过韩芝转化后,粗蛋白、氨基酸和粗灰分含量均得到不同程度的提升,其中木屑+沼渣组配方的提升幅度最大,而粗脂肪、粗纤维的含量大幅度降低且木屑+沼渣组表现得最显著。5)结合转录组学技术对木+沼灵芝与木屑灵芝的胞外酶及三萜进行差异基因分析本章分别对木+沼组和木屑组韩芝20天菌丝(MZ-20与S-20)、原基期菌丝(MZ-Y与S-Y)、成熟期子实体(MZ-F与S-F)进行转录组测序,对测序结果进行差异基因筛选。结果显示:MZ-20与S-20之间有2538个差异基因,其中上调基因有1367个,下调基因有1171个;MZ-Y与S-Y之间有3605个差异基因,其中上调基因有1646个,下调基因有1959个;MZ-F与S-F之间有1064个差异基因,其中上调基因有618个,下调基因有446个。对差异表达基因进行筛选,结果发现:与S-20对比,编码漆酶的基因在MZ-20的表达量下调;与S-Y对比,编码内切葡聚糖酶(CMC)的基因在MZ-Y的表达量上调,编码漆酶、内切1,4-β-木聚糖酶的基因在MZ-Y的表达量上调;与S-F萜类合成通路对比,编码法呢基二磷酸合成酶(FPPS)、3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMGR)的基因在MZ-F萜类合成通路上调表达。
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