【摘 要】
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三氯卡班(Triclocarban,TCC)作为抗菌剂广泛用于牙膏和织物等产品中,由于其经过处理也不能完全从生活废水中去除,加之其降解效率低,所以广泛存在于水环境中。目前,TCC已被视作新型环境内分泌干扰物。因此,关于TCC对生物影响的研究越来越受到关注,研究表明TCC对生物具有氧化损伤和内分泌干扰效应,而TCC对鱼类的研究仅限于检测胚胎抗氧化酶的活性,对其潜在的分子机制知之甚少,对不同生命阶段及
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三氯卡班(Triclocarban,TCC)作为抗菌剂广泛用于牙膏和织物等产品中,由于其经过处理也不能完全从生活废水中去除,加之其降解效率低,所以广泛存在于水环境中。目前,TCC已被视作新型环境内分泌干扰物。因此,关于TCC对生物影响的研究越来越受到关注,研究表明TCC对生物具有氧化损伤和内分泌干扰效应,而TCC对鱼类的研究仅限于检测胚胎抗氧化酶的活性,对其潜在的分子机制知之甚少,对不同生命阶段及子代的毒性效应尚不清楚。为此,本研究以斑马鱼为研究对象,探讨TCC对仔鱼及子代的潜在毒性和作用机制,为TCC对非靶标生物潜在风险的评估提供科学依据。本研究首先对斑马鱼胚胎、仔鱼、稚鱼和成鱼进行96 h急性暴露试验,明确斑马鱼对TCC最为敏感的生命阶段。接着探究了TCC短期暴露对仔鱼的影响,将受精后3天(3 days post fertilization,3 dpf)的仔鱼暴露于不同浓度(0、1.25、2.5、5、10μg/L)的TCC水体中24 h、48 h和72 h,从性激素水平、氧化应激、细胞凋亡及内分泌方面探讨TCC对其毒性。最后将成年斑马鱼(F0)暴露于TCC,暴露结束后收集暴露与未暴露亲本的F1胚胎,从发育参数、抗氧化状态下及生殖内分泌相关基因的表达水平等方面评价F0和F1都暴露、仅F0暴露及仅F1暴露于TCC对F1的毒性。主要研究结果如下:1.通过96 h急性暴露试验,揭示TCC对斑马鱼胚胎、仔鱼、稚鱼和成鱼的不同毒性,不同生命阶段的致死敏感性由高到低依次为仔鱼(32.59μg/L)、稚鱼(76.83μg/L)、成鱼(166.89μg/L)、胚胎(200.63μg/L),说明斑马鱼仔鱼阶段对TCC最为敏感。2.通过短期暴露试验,揭示TCC对斑马鱼仔鱼的多个方面造成影响:影响仔鱼抗氧化标志物超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽S-转移酶(GST)的活性、活性氧(ROS)和丙二醛(MDA)含量增加导致氧化损伤;干扰抗氧化相关基因(cat1、sod1、gstr、nrf2、keap1和cox)m RNA的表达,表明抗氧化系统的平衡遭到破坏;影响仔鱼雌二醇(E2)和卵黄蛋白原(VTG)的含量,干扰生殖内分泌相关基因star、cyp11、3β-hsd、cyp17、17β-hsd、cyp19a和vtg的表达;干扰细胞凋亡相关基因bax、bcl2、apaf1、cas9和cas3的表达,诱导细胞凋亡。3.通过将成年斑马鱼(F0)于环境相关浓度(0、1.2、6、30μg/L)TCC水体中暴露21 d,收集胚胎(F1)饲养至96 hpf,探讨亲本TCC暴露后对子代的影响:雌性亲本的产卵量及性腺体质常数(GSI)显著降低;亲本暴露于TCC会显著增加子代的死亡率和畸形率,并导致子代的体长较短及孵化时间过早;子代中cat1的表达显著下调及细胞凋亡相关基因p53、cas9和cas3的表达显著上调,表明亲本TCC暴露后子代产生氧化应激可能进一步诱导细胞凋亡;子代中cyp19b、vtg1和vtg3的表达显著上调,表明子代生殖内分泌受到干扰。
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