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【目的与背景】食管癌是在全世界是一个引起死亡主要死因。在国外,食管癌以食管腺癌为主,而在我国及亚洲地区主要以食管鳞癌为主,我国的食管癌五年生存率大概在25-40%,预后差。主要原因是食管癌早期诊断很困难,一经发现基本上以中晚期为主,失去根治手术的机会。食管癌治疗手段有限,目前靶向治疗还不成熟,还停留在临床基础研究当中。因此,寻找食管癌特异分子标志物来指导早期诊断、生物靶向治疗显得尤为重要。食管癌的发生是一个错综复杂的过程,涉及到多阶段、多基因、多因素,因此,其复杂的发病机制是目前难以克服食管癌的一个重要原因。既往的食管癌分子标志物研究也得到很多令人兴奋的结果,但是并没有在临床实践中得以推广。本文的研究主要是前期开展的蛋白组学筛选出的差异蛋白,运用细胞学实验来验证差异蛋白的生物学功能。通过寻找差异蛋白分子标志物为食管癌的生物靶向提供基础理论依据,从而对治疗食管癌早期诊断、预后判断提供帮助。【材料与方法】选择EC109及EC9706食管癌细胞株作为实验对象,通过小干扰RNA技术(RNAi)敲除原肌球蛋白3(TPM3)。将细胞处于最佳状态是进行转染TPM3小干扰RNA片(TPM3-oligo)。通过摸索实验条件确定敲除TPM3最佳条件进行一下一系列实验:细胞划痕实验、细胞迁徙实验、平板克隆实验、细胞增殖实验,并进行TPM3蛋白相关机制研究。收集临床2003-2007年福建医科大学附属协和医院食管癌标本,包括癌和癌旁组织,通过TPM3染色进行免疫组化实验,运用免疫组学评分法统计癌组织及癌旁TPM3表达,并用SPSS 19.0软件进行Kaplan–Meier方法进行预后分析。【结果】TPM3沉默的后细胞明显抑制细胞的侵袭及转移能力。同时,敲出TPM3后抑制克隆形成。在癌和癌旁临床标本中,癌组织的TPM3阳性率53.11%明显高于癌旁组织的7.34%(P<0.05)。并且,发现高表达的TPM3的癌组织的病人中,其预后较低表达的差(Log Rank,P=0.015)。【结论】在组织学中,高表达的TPM3与食管癌预后差相关。我们发现高表达的TPM3的食管癌组织病人中与预后差相关。在细胞学中,TPM3蛋白沉默后可以明显抑制食管癌细胞株的侵袭转移效应。