宽噬噬菌体治疗实验性小鼠产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌感染的研究

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目的研究自医院污水中分离、筛选获得的产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)大肠埃希菌噬菌体宽噬株,治疗小鼠产ESBLs大肠埃希菌感染的疗效。方法以30株产ESBLs大肠杆菌为宿主菌,从医院污水中分离获得噬菌体,筛选出宽噬噬菌体,进行吸附实验、一步生长实验、噬菌体DNA初步酶切分析和电子显微镜观察。建立小鼠全身感染模型,观察宽噬噬菌体治疗小鼠的细菌感染的疗效。结果所筛选出的宽噬噬菌体?9882其宽噬率为36.7%,滴度为8.1×1018pfu/ml。5分钟吸附率约为98%,潜伏期约为30~40分钟,裂解量约为110。?9882的DNA约为30kb。电镜显示,?9882具有直径70nm微球形颗粒头部,棱角不明显,可见100nm尾轴。细菌感染的小鼠立即腹腔注射纯化的宽噬噬菌体?9882(MOI≥10-4, multiple of infection,感染复数),小鼠存活率为100%。?988(2MOI, 200)延迟1小时治疗感染的小鼠仍有60%的生存率。热失活?9882治疗感染的小鼠生存率为0。结论分离、筛选所获得的?9882为宽噬噬菌体,裂解谱宽,吸收率高,潜伏期短,裂解细菌能力强。通过噬菌体治疗剂量、延迟治疗、热失活、体内分布和免疫反应方面的研究,宽噬噬菌体?9882能有效地治疗小鼠产ESBLs大肠埃希菌感染,无不良副作用,从而为进一步应用噬菌体进行临床抗感染治疗奠定基础。
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