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神经病理性疼痛是由中枢或外周神经损伤，或疾病引起的一种慢性疼痛，包括痛觉超敏、痛觉过敏以及自发性疼痛等综合症状。长时间的疼痛对于动物和人的健康具有极大的影响。药物治疗是目前缓解神经病理性疼痛的主要方法，但是药物治疗效果不佳且存在副作用。电针镇痛是在传统手针刺激特定穴位的基础上结合电刺激的一种现代疗法。电针镇痛具有副作用小、镇痛效果明显、操作简单且可控性强等优点，在兽医和人医临床上得到了广泛应用。研究表明电针刺激对神经病理性疼痛方面有较好的镇痛效果，但是电针治疗神经病理性疼痛的机制研究尚不十分清楚。 研究表明外周神经损伤后，兴奋性神经递质，尤其是谷氨酸(glutamate，Glu)在脊髓背角释放增多，通过作用于突触后膜相应受体加强突触后神经元的兴奋性，进而形成脊髓背角中枢敏化，最终导致异常性疼痛的神经病理性疼痛现象。突触结合蛋白-Ⅰ(SynaptotagminⅠ，SytⅠ)是一种突触前囊泡膜蛋白，作为Ca2+感受器蛋白，其主要作用是促进神经递质的释放，参与突触可塑性的调控。有研究表明突触结合蛋白-Ⅰ可以调节谷氨酸的释放。本实验室通过高通量测序技术发现SytⅠ基因在针刺山羊中枢中存在差异表达。因此，我们推测SytⅠ可能参与神经病理性疼痛的形成以及电针可能通过调节SytⅠ的表达来缓解神经病理性疼痛。 为探究SytⅠ在神经病理性疼痛中的作用，本试验通过坐骨神经分支选择性损伤手术建立神经病理性疼痛模型(spared nerve injury，SNI)大鼠，鞘内注射不同剂量SytⅠ抗体，检测各组大鼠足底机械痛阈(paw withdrawal threshold，PWT)的变化。试验将30只SD大鼠随机分成5组:假手术组（Sham）、神经损伤组(SNI)和神经损伤+不同剂量SytⅠ抗体组(1μg，SNI+anti-Syt-1μg;4μg，SNI+anti-Syt-4μg;8μg，SNI+anti-Syt-8μg)。神经损伤组及神经损伤+不同剂量SytⅠ抗体组均做坐骨神经分支选择性损伤手术和鞘内置管，假手术组按照相同方法只做假手术处理不损伤神经。SNI大鼠术后8d开始，鞘内注射不同剂量SytⅠ抗体，每两天一次，共7次，采用足底触觉测定仪测定术前(0d)、术后7d、8d、14d和20d各组大鼠手术肢足底机械痛阈，观察不同剂量SytⅠ抗体对大鼠神经病理性疼痛的影响。 为探究电针对SNI大鼠脊髓SytⅠ表达变化的影响，另取54只SD大鼠随机分成3组:假手术组（Sham组）、神经损伤组（SNI组）和神经损伤+电针组(SNI+EA组）。SNI组和SNI+EA组均做坐骨神经分支选择性损伤手术建立神经病理性疼痛模型，Sham组按照相同方法做假手术处理不损伤神经。于术前(0d)、术后7d、8d、14d和20d，通过足底触觉测痛仪测定各组大鼠手术肢足底机械痛阈。术后第8天，采用电针(2Hz，1～3mA)刺激SNI+EA组大鼠两侧“足三里”和“三阴交”穴，30min/次，每两天一次，共7次。术后8d、14d和20d足底机械痛阈测定后，立即采集大鼠脊髓L4～L6段样品，采用qPCR、蛋白免疫印迹(Western Blot)和免疫组织化学(IHC)方法检测各组大鼠脊髓SytⅠ表达水平的变化。 鞘内注射SytⅠ抗体试验结果显示，SNI组大鼠在7d机械痛阈开始显著下降并且持续至20d，而注射4μg或者8μg SytⅠ抗体组在8d、14d和20d大鼠机械痛阈显著高于SNI组和注射1μg SytⅠ抗体组(p＜0.05)，且注射8μg SytⅠ抗体组的大鼠痛阈升高最明显，但显著低于Sham组(p＜0.05）。表明坐骨神经分支选择性损伤大鼠术后出现机械痛觉超敏，而注射SytⅠ抗体剂量依赖性地缓解了SNI模型大鼠痛觉超敏现象。 电针处理试验结果显示，在术后14d和20d，SNI+EA组大鼠的机械痛阈显著高于SNI组(p＜0.05)，并与Sham组无显著差异(p＞0.05)，在20d机械痛阈升高最显著，表明电针能够显著逆转神经损伤引起的大鼠机械痛阈降低的现象，且出现镇痛累加效应。qPCR结果显示，在8d、14d和20d，同时段各组之间SytⅠ的mRNA水平表达没有显著差异(p＞0.05)。Western Blot结果显示，SNI组大鼠脊髓中SytⅠ的蛋白表达量在术后8d、14d和20d显著高于Sham组(p＜0.05)。而SNI+EA组大鼠脊髓中SytⅠ的蛋白表达量在14d和20d显著低于SNI组(p＜0.05)，与Sham组之间差异不显著(p＞0.05)。显示电针能够显著降低SNI模型大鼠脊髓中SytⅠ蛋白表达。免疫组织化学结果显示SytⅠ蛋白主要在脊髓背角Ⅰ和Ⅱ层中表达有差异，且与Western Blot结果变化趋势相符。 本研究通过建立SNI神经病理性疼痛模型大鼠，鞘内注射SytⅠ抗体探讨大鼠脊髓SytⅠ在神经病理性疼痛形成中的作用，以及电针对SNI模型大鼠足底机械痛阈和脊髓SytⅠ表达变化的影响。结果表明SytⅠ参与了神经病理性疼痛的形成，电针可以通过下调SytⅠ蛋白表达进而缓解神经病理性疼痛，本研究有助于阐明电针治疗神经病理疼痛的中枢机制。