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研究背景脑膜瘤是颅内高发的良性肿瘤,手术治疗是主要的治疗方法,但临床上放射治疗以及其他非手术治疗也是重要的辅助手段,因此探讨脑膜瘤新的治疗靶点也是目前研究热点之一。PPAR—γ是一种细胞核转录因子,与糖代谢调节、脂肪细胞分化相关。其配体除了具有改善胰岛素抵抗和血脂、免疫调节和抗炎作用外,还具有抗肿瘤细胞增殖和促细胞分化作用,对肿瘤细胞的转移、侵袭等生物学行为也有影响。PPAR-γ及其激活剂曲格列酮在脑膜瘤中的研究少有报道,本课题拟通过RT-PCR、免疫组化以及体外实验探讨PPAR-γ在脑膜瘤中的表达及其激活剂曲格列酮对细胞生长的影响。本课题共分为两个部分:ⅠPPAR-γ在脑膜瘤中的基因和蛋白表达研究目的探讨PPAR-γ在脑膜瘤中的基因和蛋白表达,并探讨其表达与脑膜瘤增殖指标的关系。方法应用RT-PCR、免疫组化的方法对48例脑膜瘤的手术标本进行研究:应用异硫氰酸胍法提取总RNA;逆转录获取cDNA,进行PCR反应并琼脂糖凝胶电泳后,凝胶成像系统定量分析。按SP免疫组化染色方法检测PPAR-γ的表达,并以增殖细胞抗原为指标检测增殖情况,采用双盲法观察其结果。结果非典型性组((?)=0.465±0.375)明显高于良性组(x=0.766±0.481,t=7.56,P＜0.01);女性表达略高于男性(t=5.68,P＜0.05)。免疫组化结果显示所有标本均有PPAR-γ表达,与良性组相比,非典型性组PPAR-γ蛋白表达较强(P＜0.05),PPAR-γ蛋白表达与脑膜瘤患者的年龄、性别均无明显相关(P＞0.05)。结论非典型脑膜瘤组PPAR-γ表达高于良性组,其表达与增殖活性成正相关。Ⅱ曲格列酮对脑膜瘤细胞的体外实验目的探讨PPAR-γ激活剂曲格列酮在脑膜瘤细胞中可能的抗肿瘤作用。方法选取人脑膜瘤细胞16例(Ⅰ级,良性,10例;Ⅱ级,非典型性,6例)进行,应用MTT方法检测曲格列酮对脑膜瘤细胞生长的作用,应用流式细胞仪检测曲格列酮干预后肿瘤细胞凋亡情况。结果MTT实验显示试验组OD值均明显低于正常对照组,曲格列酮促进细胞凋亡(或死亡)与浓度有密切关系,即药物浓度越大,其OD值越小。浓度为1μmol/L的曲格列酮对体外培养的脑膜瘤细胞生长无明显影响;浓度为10或50μmol/L时的曲格列酮作用24小时后OD值低于对照组(P＜0.05),72小时抑制最明显(P＜0.01),120小时以后抑制作用减弱。FCM检测结果表明,脑膜瘤细胞经不同浓度的曲格列酮作用24h、48h、72h、120h的凋亡率的实验结果表明实验组与对照组之间及不同浓度组之间,有显著性差异(P＜0.05);各时间组与对照组之间及不同时间组之间也有显著性差异(P＜0.05)。分析显示曲格列酮作用脑膜瘤细胞后,可明显诱导细胞凋亡,且随作用浓度和作用时间的延长,凋亡率显著增加;但在50、100μmol/L作用72h后,死亡细胞亦明显增加。结论浓度为10或50μmol/L时的曲格列酮作用24小时不但可以抑制脑膜瘤细胞生长而且可以诱导凋亡,72小时抑制最明显(P＜0.01),120小时以后抑制作用减弱。在体外,曲格列酮影响脑膜瘤细胞生长和凋亡的作用具有浓度依赖性。