第一部分正常男性精子中Clusterin的起源和定位目的：哺乳动物精液中的clusterin是一种具有异源二聚体结构的分泌型蛋白，主要由附睾和精囊分泌。当前认为clusterin主要存在于异常精子表面，与精子活力下降、精子聚集以及男性不育等相关。然而，关于人类正常精子中clusterin的相关研究较少。本实验旨在系统地研究人类正常精子中clusterin的起源和定位问题。方法：收集8名男性的正常新鲜精液标本，采用非连续密度梯度离心法分离纯化出高活力的正常精子。分别采用western免疫印迹法和免疫荧光技术检测clusterin在正常精子中的表达和定位；运用western免疫印迹法和免疫组化方法研究clusterin在人类睾丸中的分布特点。结果：本研究发现，天然的clusterin定位于正常精子的质膜内部。它起源于睾丸曲细精管中的晚期生精细胞，与分泌型clusterin有着相似的分子量和异源二聚体结构。结论：人类正常精子中的clusterin可能在精子发生的终末阶段由自身合成。Clusterin在正常精子表面不同以往的分布和起源特点表明，与异常精子表面传统的分泌型clusterin蛋白相比，正常精子表面的clusterin是一种全新的蛋白形式。第二部分Clusterin在特发性弱精子症患者精子中的表达目的：弱精子症是导致男性不育的常见独立发病因素，病因复杂，治疗手段有限，目前已经成为危害男性生殖健康的社会问题。有关clusterin在弱精子症患者精子中的表达及其与弱精子症发生机制的相关研究较少。本研究采用实时荧光定量-聚合酶链反应（Real-Time PCR）和Western印迹技术半定量检测clusterin在正常男性和特发性弱精子症患者精子中表达的差异，进而探讨clusterin在特发性弱精子症发生机制中的作用。方法：采用非连续密度梯度离心法分离纯化22例特发性弱精子症和24例正常男性精子，通过Real-Time PCR和Western印迹方法，分别从基因和蛋白水平检测clusterin的表达差异。结果：Real-Time PCR结果表明，clusterin mRNA在特发性弱精子症患者精子中的表达较正常男性显著降低(0.11±0.07比0.98±0.26，t=9.15，P＜0.001)；Western印迹结果示，clusterin蛋白在特发性弱精子症患者精子中的表达较正常男性亦显著降低(0.66±0.21比1.44±0.38，t=6.29，P＜0.05)。结论：特发性弱精子症患者精子中的clusterin表达量显著降低，可能是导致弱精子症发生的重要环节之一。本研究的发现为深入研究探讨弱精子症的发生机制提供了新的理论依据和实验思路。