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山羊奶丰富的脂肪酸成分赋予其独特的营养价值,其中多不饱和脂肪酸具有预防心血管疾病和提高机体免疫力等功能,对人体具有重要的生理意义。脂肪酸去饱和酶2（Fatty acid desaturation 2）作为多不饱和脂肪酸如花生四烯酸（AA）和二十二碳六烯酸（DHA）等合成过程中的限速酶,可以在脂肪酸链的第6、7位将其底物脱氢形成双键。因此,研究FADS2基因功能及转录调控机理对于羊奶多不饱和酸脂肪酸代谢具有重要的理论意义和实践指导意义。本研究以奶山羊（Capra hircus）原代乳腺上皮细胞为材料,利用PCR技术克隆得到奶山羊FADS2基因序列,并进行生物信息学分析;利用腺病毒介导的过表达技术和si-RNA介导的干扰技术研究奶山羊FADS2基因对山羊乳腺脂肪酸代谢的影响;克隆FADS2基因的5’侧翼序列,并进行生物信息学分析;通过缺失突变方法确定FADS2启动子的活性区域,同时突变活性区域的重要元件初步探究FADS2基因的转录调控机理。本研究主要结果如下:1.成功克隆得到FADS2基因（登录号为MK292654）的CDS区1 335 bp,编码444个氨基酸,与绵羊（Ovis aries,XM015103138.2）和牛（Bos taurus,NM001083444.1）具有高度同源性。组织表达谱分析发现,FADS2基因在肝脏中表达量最高,小肠中表达量最低。2.筛选得到一条有效的siRNA序列,在mRNA及蛋白水平显著下调FADS2基因的表达。FADS2被干扰后,显著上调与多不饱和脂肪酸合成相关如ELOVL2、ELOVL6和FADS1基因表达;促进转录因子SREBP1,脂肪酸从头合成基因FASN、ACACA及去饱和酶SCD1的基因表达,抑制脂肪酸氧化PPARA和脂肪酸转运FABP3基因表达;并且显著降低细胞中AA和DHA比例,抑制多不饱和脂肪酸的合成,降低细胞中甘油三酯（TAG）含量。3.成功构建了奶山羊Ad-FADS2重组腺病毒过表达载体,并得到高滴度的腺病毒;过表达FADS2基因,抑制与多不饱和脂肪酸合成如FADS1、ELOVL2、ELOVL5和ELOVL6基因的表达,同时抑制转录因子SREBP1基因和脂肪酸从头合成相关基因表达,但是激活PPARA基因以及促进脂肪酸氧化代谢,同时促进脂肪酸转运FABP3基因表达;过表达FADS2基因,增加细胞中AA和EPA的含量,促进多不饱和脂肪酸合成;同时增加与甘油三酯合成相关基因的表达,促进细胞中甘油三酯的积累。4.成功克隆得到奶山羊FADS2启动子全长序列2 226 bp;经过生物信息学分析,FADS2启动子序列存在SREBP1、LXR、PPARs、NF-Y及SP1等重要转录因子结合位点。通过5’端侧翼序列缺失突变分析发现奶山羊FADS2基因启动子的核心区域位于-375-26bp之间。同时构建核心区域中SRE、SP1和NF-Y的突变重组双荧光素酶报告载体,以及检测过表达SREBP1对各个缺失片段和突变载体启动子活性的影响发现,SREBP1通过活性区域的SRE和NF-Y位点直接调控FADS2基因的启动子活性。综上所述,FADS2基因增加乳腺细胞中AA、EPA和DHA含量,促进奶山羊乳腺多不饱和脂肪酸的合成;此外,FADS2转录活性直接受上游转录因子SREBP1的调控。