【摘 要】
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蓝细菌在碳循环中起重要作用,而低pH是蓝细菌常见的环境胁迫之一。目前,尽管已有少数文献报道蓝细菌对酸性胁迫的分子机制,但是与酸胁迫相关的调节机制还远未完全阐述。本研
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蓝细菌在碳循环中起重要作用,而低pH是蓝细菌常见的环境胁迫之一。目前,尽管已有少数文献报道蓝细菌对酸性胁迫的分子机制,但是与酸胁迫相关的调节机制还远未完全阐述。本研究用同源双交换技术构建了44株缺失反应调节因子的基因缺失突变株,通过筛选各突变株在酸胁迫下的生长状况,发现△slr1909在pH 6.1-6.5条件下,与野生株相比生长速率变慢。综合使用iTRAQ联合LC-MS/MS蛋白组学方法、GC-MS代谢组学方法和实时荧光定量PCR方法,我们初步构建了反应调节蛋白Slr1909的酸性应答调控网络。结果显示,由Slr1909调控的信号转导途径与之前报道的SphS-SphR调节途径可能是相互独立的,因为酸胁迫下,SphS-SphR调节途径中差异表达的蛋白在突变株?slr1909中并未出现差异表达现象。蛋白组学分析表明,经过酸处理的突变株与野生株相比,有24个表达量上调的蛋白和10个表达量下调的蛋白。值得指出的是,三个蛋白质,Slr1259,Slr1260和Slr1261其编码基因似乎位于一个操纵子上,在slr1909基因被敲除后,表达量均下调,说明这些蛋白在酸性环境下行使特定的功能。此外,代谢组分析鉴定了十几个突变株和野生株在酸胁迫下差异表达的代谢产物,其中包括一些单糖和脂肪酸。本研究利用蛋白质组和代谢组学技术阐明了集胞藻PCC 6803反应调节蛋白Slr1909在酸性环境中的调控机制。
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