【摘 要】
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本研究根据不同品种棉花全基因组数据,鉴定出P-ATPase家族基因,并进行生物信息学分析,筛选出棕色棉中可能与原花青素转运有关的P-ATPase基因,并对其功能进行研究分析,主要实验结果如下:(1)在亚洲棉、雷蒙德氏棉、海岛棉和陆地棉中分别鉴定出53、51个、99和98个P-ATPase基因。不同棉花中,P-ATPase能分为6个亚族,且同一亚族的成员具有相同或相近的基因结构,不同亚族成员基因结构
【基金项目】
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国家自然科学基金(31672497); 安徽省第四批“115”产业创新团队(皖人才办[2011]2号)
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本研究根据不同品种棉花全基因组数据,鉴定出P-ATPase家族基因,并进行生物信息学分析,筛选出棕色棉中可能与原花青素转运有关的P-ATPase基因,并对其功能进行研究分析,主要实验结果如下:(1)在亚洲棉、雷蒙德氏棉、海岛棉和陆地棉中分别鉴定出53、51个、99和98个P-ATPase基因。不同棉花中,P-ATPase能分为6个亚族,且同一亚族的成员具有相同或相近的基因结构,不同亚族成员基因结构则有较大差距,且在陆地棉中,P-ATPase基因功能具有多样性。(2)根据不同时期棕色棉纤维中P3A亚族基因表达量模式和原花青素含量变化趋势,推测出5个可能与原花青素转运相关的候选基因,其中GhAHA10与拟南芥AtAHA10同源性最高,且在复合进化树中与AtAHA10亲缘关系最近,将其重新命名为GhTT13。(3)从棕色棉纤维中克隆出GhTT13,其蛋白的三级结构与拟南芥AtAHA10相似,跨膜结构分析表明该蛋白为膜蛋白,同时亚细胞定位结果显示GhTT13定位在膜上。(4)将GhTT13转化野生型拟南芥并获得T3代转基因植株,DMACA染色和原花青素含量测定表明转基因拟南芥中原花青素含量高于野生型,且原花青素代谢途径中一些其他相关基因的表达高于野生型,表明GhTT13影响拟了南芥种皮中原花青素的积累。(5)利用花粉管通道法成功转化了棕色棉和白色棉,分别获得了4株和2株转基因棉花。转基因棉花叶片中GhTT13表达和原花青素含量均高于未转化棉花,推测GhTT13参与了原花青素代的转运和积累。
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