阳和平喘颗粒的制备工艺、质量控制及初步药效学研究

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目的:阳和平喘颗粒为安徽中医药大学第一附属医院医院制剂,临床上用于治疗多种原因所致的支气管哮喘症。目前该制剂的药学研究相对薄弱,本课题结合现代药物制剂技术对阳和平喘颗粒的制备工艺进行考察,建立准确可行的质量控制方法,并对优选出的制备工艺进行初步的药效学研究,为该制剂的深入研究提供可靠的实验依据,为将其开发成为中药新药奠定基础。方法:1.对全方采用乙醇回流法提取,选择四因素三水平(L9(34))正交试验法安排实验,以盐酸麻黄碱、五味子醇甲、芥子碱硫氰酸盐含量及浸膏得率为考察指标,对乙醇浓度、乙醇用量、提取时间、提取次数进行考察,利用综合评分法进行数据分析,优选最佳提取工艺,并对最佳提取工艺的稳定性进行验证。2.以吸湿性为指标筛选辅料的种类及用量,以颗粒的成型率为指标筛选最佳成型工艺的条件,并对颗粒的休止角,吸湿率和临界相对湿度进行考察。3.采用薄层色谱法(TLC)对方中主要药材麻黄、熟地黄、旋覆花、巴戟天、五味子、葶苈子、芥子、当归进行定性鉴别,采用超高效液相色谱法(UPLC)测定君药麻黄中盐酸麻黄碱,臣使药中五味子醇甲和芥子碱硫氰酸盐含量。通过定性和定量方法相结合控制该制剂的质量。4.药效学实验,采用经典的卵清白蛋白(OVA)致敏和攻击法复制大鼠哮喘模型。考察阳和平喘颗粒对哮喘大鼠肺组织、血清中一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)含量及肺组织中诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达水平的影响。结果:1.优选出的最佳提取工艺为:加8倍量80%的乙醇回流提取2次,每次1.5h,滤过,合并滤液,静置12h后,滤过,滤液减压浓缩至无醇味,70℃真空干燥得到疏松干燥物,粉碎得浸膏粉。2.选择微晶纤维素和β-环糊精为辅料,甜菊素为矫味剂。加入浸膏粉0.8倍量的辅料(微晶纤维素/β-环糊精=3:1)混合均匀,加95%的乙醇制粒,60℃干燥,整粒。3.TLC定性鉴别麻黄、巴戟天、旋覆花等药材色谱斑点清晰,方法简便,阴性无干扰。通过UPLC法分别测定了优选出的阳和平喘颗粒中有效成分的含量,盐酸麻黄碱、五味子醇甲、芥子碱硫氰酸盐含量平均分别为0.762、0.403、2.181mg·g-1,测定方法准确,专属性强,重现性好。4.成功复制了大鼠哮喘模型,治疗组可明显改善大鼠的一般状态,肺组织病理损伤减轻,显著降低NO、ET-1、iNOS的表达水平。结论:本课题优选出的阳和平喘颗粒最佳制备工艺合理、可行;所建立的质量控制方法准确、专属性强,能够较全面控制该制剂的质量。药效学实验结果表明阳和平喘颗粒能降低哮喘大鼠模型血清中NO、ET-1的含量,降低肺组织中iNOS的表达水平,改善肺组织炎症细胞的浸润,对哮喘大鼠具有一定的保护作用。
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