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背景原发性肝癌是最常见的恶性肿瘤之一,其肿瘤相关死亡率在我国恶性肿瘤中排名居第二位。手术切除、肝脏移植、放化疗、姑息治疗虽然能让患者得到康复,但疗效有限。最近几年以来,免疫疗法研究进展迅速,已成为继上述方法后最具希望的肿瘤治疗方式之一。是以,对肝癌免疫治疗进行深入探究具有深远的意义。程序性死亡因子配体1(PD-L1)作为免疫监测点因子,在多种肿瘤细胞中异常上调,从而抑制T淋巴细胞的免疫活性,造成肿瘤的免疫逃逸。PD-L1的表达受多种机制调控,部分研究发现其表达与病毒感染有关,但具体的机制仍然不是很清楚。乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)感染是肝癌最常见的病因之一,其中的X基因表达产物(HBx)在肝癌发生与发展过程中起着至关重要的作用。目的阐明HBx和PD-L1在肝细胞癌中的作用,探索HBx蛋白对肝细胞癌PD-L1表达的影响,并深入研究其中的机制。研究HBx蛋白在肝癌患者中的临床意义。方法免疫荧光染色法检测SMMC7721(乙肝阴性的肝癌细胞)和PLC/PRF/5(乙肝阳性的肝癌细胞)中HBx和PD-L1的含量及定位。实时荧光定量法检测SMMC7721和PLC/PRF/5细胞中HBx和PD-L1在m RNA上的表达水平。Western Blot法检测SMMC7721和PLC/PRF/5细胞中HBx和PD-L1在蛋白上的表达水平。相关性曲线表明HBx和PD-L1在基因和蛋白表达水平上的相关性。质粒转染技术将HBx质粒和空载质粒转染到SMMC7721细胞,并用实时荧光定量法和Western Blot法检测HBx和PD-L1在基因和蛋白水平上的表达变化。si RNA沉默技术应用于PLC/PRF/5细胞后用实时荧光定量法和Western Blot法检测HBx和PD-L1在基因和蛋白水平上的表达变化。Western Blot法检测各种细胞中NF-κB,p-NF-κB,JAK2,p-JAK2,STAT3,p-STAT3蛋白表达的变化,探索其中的分子机制。Transwell法测定各种细胞迁移和侵袭能力的大小。免疫组织化学法检测肝癌患者组织标本中PD-L1的表达。结果HBx能上调SMMC7721细胞中PD-L1的表达,并且两者呈正相关。抑制HBx后,PLC/PRF/5细胞中PD-L1的表达也随之下降。HBx转染和沉默后NF-κB,JAK2,STAT3蛋白表达量基本没变化,而p-NF-κB,p-JAK2,p-STAT3随着HBx的变化而变化。对细胞迁移和侵袭能力方面的影响,转染HBx后SMMC7721的能力升高,而沉默HBx后PLC/PRF/5细胞的能力下降。感染HBV的肝癌患者组织标本中PD-L1表达的阳性率高于未感染HBV的肝癌患者。结论HBx能诱导肝细胞癌细胞PD-L1的表达,而si RNA能沉默这个过程,降低PD-L1的表达。HBx可能通过活化NF-κB、JAK/STAT信号通路中的某些核心因子介导肝癌细胞中PD-L1的表达。HBx转染后肝癌细胞的迁移和侵袭能力都有所增强,暗示预防乙肝感染或许能降低肝细胞癌的迁移和侵袭能力。预防HBV的感染和切断PD-1/PD-L1分子路径的传递能降低PD-L1的表达,降低癌细胞的迁移和侵袭能力,这可能为乙肝相关性肝细胞癌的治疗挖掘新的思路和方向。