酚氧化酶（Phenoloxidase,PO）,又称酪氨酸酶（Tyrosinase）是一种广泛存在于无脊椎动物与脊椎动物体内的含铜的酶,能够催化单酚羟化成二酚,并把二酚迅速氧化成醌,而醌在非酶促条件下自氧化生成反应终产物黑色素。酚氧化酶在无脊椎动物体内以酶原形式存在,广泛参与无脊椎动物的防御反应。 本文提取了青岛文昌鱼体液与体表粘液,并通过硫酸铵沉淀加以初步纯化,作为青岛文昌鱼体液与体表粘液中酚氧化酶的粗提物。本文利用多种生化手段初步研究了青岛文昌鱼体液与体表粘液中酚氧化酶的性质,并且首次对这两种不同组织来源的酶进行了初步的比较。 本文以L-DOPA为底物,研究了多种激活抑制因子对体液与体表粘液中酚氧化酶的作用,结果显示Ca²⁺、Mg²⁺、SDS、Trypsin、LPS、Zs能够同时显著提高两种来源的酶的活性,Zn²⁺轻微的提高酶活,Cu²⁺、PTU、STI、EDTA均能同时显著抑制两种来源的酶的活性,EGTA轻微抑制酶活,并且EDTA对两种酶活的抑制均可通过Ca²⁺的加入得到恢复,证明了在青岛文昌鱼体液与体表粘液中酚氧化酶均以酶原形式存在,并且具有相近的激活抑制行为。 本文比较了两种来源的酚氧化酶的最适底物、最适温度和最适pH值,结果显示青岛文昌鱼体液中最适底物为多巴胺,最适温度为35℃,最适pH为7.5;体表粘液中最适底物为多巴胺,最适温度为45℃,最适pH为9。结果证明了两种酚氧化酶均属酪氨酸酶型。