前言及目的 卵巢原发性恶性肿瘤中,60%～90%是上皮性癌,卵巢上皮性癌(卵巢癌)是病死率最高的妇科恶性肿瘤,尽管随着手术技巧的提高可以做到最大限度的肿瘤细胞减灭术,且铂类、紫杉醇类以及二线化学药物治疗(化疗)的临床应用给患者带来多重生机,但是卵巢癌因临床症状隐匿,诊断时超过70%的患者已属晚期,相当一部分患者在手术和化疗后仍会出现疾病进展或者复发,5年生存率不到30%。表皮生长因子受体-2(HER-2)原癌基因编码—185kD具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白,在卵巢癌中多伴随过度表达,并与患者的不良预后及对各种治疗的抗性有关。在人类,HER-2多通过野生型基因的扩增和过表达激活,之后,通过一定的信号转导通路最终影响细胞的增殖、分化、迁移、黏附、转化、存活、凋亡,使得细胞增殖加快、细胞周期加速、恶性表现增强,并出现抗凋亡现象。若能把HER-2的信号功能敲除就能消弱和减少恶性细胞的生长。RNA干扰(RNA interference,RNAi)是近年来发现的,由与靶基因序列同源的双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)介导的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。RNAi实验时,靶位点的设计是RNAi成功的关键。目前,RNAi的实施方法有五种,化学合成21-23bp的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)虽然能有效降低靶基因的表达,但合成费用昂贵而限制了其广泛应用;载体介导的RNAi适合特异性靶位点选出后的研究,用于靶位点的筛选比较繁琐;鸡尾酒法和siRNA表达框这两种方法也不适合基因靶位点的筛选。因此我们采用T7RNA体外转录以获取siRNA。第一部分:癌基因HER-2 RNAi的靶位点的筛选及鉴定;第二部分:观察抑制人卵巢癌细胞株SKOV-3细胞HER-2的表达后,其对卵巢癌细胞系SKOV-3生物学特性的影响;第三部分:观察其对卵巢癌顺铂敏感性的影响,为卵巢