研究目的非小细胞肺癌作为最主要的肺癌已成为癌症死亡之首。放射治疗是早期非手术和局部晚期非小细胞肺癌患者不可或缺的治疗手段,增强肿瘤细胞的放疗敏感性对提高放疗疗效至关重要。本研究目的在于探究抑癌基因CMTM7对非小细胞肺癌放疗敏感性的影响,以期为改善非小细胞肺癌患者的放疗效果提供新的思路。研究方法利用CRISPR/Cas9技术敲除非小细胞肺癌细胞A549中CMTM7的表达,用RT–PCR和Western Blot验证CMTM7敲除情况。采用0Gy、2Gy、4Gy、6Gy、8Gy的6MV-X射线照射野生型A549-WT细胞和CMTM7敲除型A549-B2细胞,通过克隆形成实验检测CMTM7对非小细胞肺癌细胞增殖的影响。采用Annexin V/PI双染法,并借助流式细胞仪检测0Gy、6Gy照射后,CMTM7对非小细胞肺癌细胞凋亡的影响。利用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色,并借助流式细胞仪检测0Gy、6Gy照射后,CMTM7对非小细胞肺癌细胞周期的作用。通过Western Blot检测0Gy、6Gy照射后,CMTM7对DNA损伤标记物γ-H2AX蛋白表达和AKT信号通路的影响。建立A549-WT、A549-B2移植裸鼠模型,用0Gy、10Gy照射后分别记录裸鼠体重变化和肿瘤体积。研究结果RT–PCR和Western Blot证实CMTM7在A549-WT细胞中高表达,而A549-B2细胞无CMTM7表达,即CRISPR/Cas9技术成功敲除野生型A549细胞CMTM7。在不同剂量X射线照射条件下,A549-B2细胞比A549-WT细胞克隆形成能力强、生长速度快,即CMTM7敲除显著促进放疗条件下的细胞增殖。照射后A549-WT组与A549-B2组凋亡几乎没有区别,即CMTM7对放疗诱导的非小细胞肺癌细胞凋亡无明显影响。CMTM7敲除促进了放疗诱导的G2期阻滞。在敲除CMTM7后,γ-H2AX蛋白表达明显下调,表明CMTM7敲除促进了DNA的损伤修复。敲除CMTM7促进AKT磷酸化。CMTM7敲除组的肿瘤体积明显大于野生组的肿瘤体积,各组小鼠间的体重无明显差异。研究结论本研究表明了CMTM7参与对非小细胞肺癌体内外放疗敏感性的调控,初步证实在非小细胞肺癌中,敲除CMTM7促进放疗诱导的DNA损伤修复,降低放疗敏感性。