榄香烯对人胶质瘤U251细胞株体外放射增敏机制研究

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目的榄香烯(1-甲基-1-乙烯基-2,4-二异丙基环己烷)是从中草药科植物温郁金中提取的天然混合物。作为国家二类抗肿瘤新药,榄香烯具有广谱抗肿瘤、毒副反应小的特点。最近研究表明榄香烯还具有增强肿瘤细胞系体外及动物模型种植肿瘤的放射敏感性的作用。我们前期实验证明榄香烯可以提高人胶质瘤U251细胞系体外放射敏感性。但其作用机制尚不太清楚。此次实验,我们进一步对其机制进行探讨。方法用MTT法检测榄香烯对人胶质瘤U251细胞的增殖抑制作用及榄香烯(40mg/L)对U251细胞放射增敏作用。将U251细胞分成四组:对照组、榄香烯组(40mg/L)、放射组(3Gy)及联合组(40mg/L+3Gy)。流式细胞仪技术检测各组细胞周期分布及凋亡。Western检测相应周期调控蛋白及凋亡相关蛋白表达变化。检测结果应用双因素方差分析法进行分析。结果MTT法检测榄香烯作用人胶质瘤U251细胞24h的半数生长抑制剂量(IC50)为72.04mg/L。榄香烯放射联合作用(40mg/L+2Gy/4Gy/6Gy/8Gy)比同剂量放射组显著抑制细胞生长(P<0.05)。联合组细胞早期凋亡率(23.98%)较放射组(9.45%)显著提高(P=0.000),G2/M期细胞比率亦由6.63%增高至18.89%(P=0.000)。榄香烯与放射对cyclin B1蛋白存在交互作用(P=0.007)。放射组cyclin B1蛋白相对表达量为0.49,相较对照组(0.30)有显著提高(P=0.021)。而联合组cyclin B1相对表达量降低至0.20,相较放射组有显著差异(P=0.002)。榄香烯可显著降低cdc2、p-cdc2(Thr161)和survivin的表达(P<0.05)。结论榄香烯可能通过降低cdc2、p-cdc2(Thr161)及放射诱导的cyclinB1表达,诱导细胞G2/M期阻滞;通过下调survivin表达,增加胶质瘤U251细胞体外放射敏感性作用。
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